内皮祖细胞通过调控lncRNAs改善戊四氮诱导的大鼠癫痫发作：神经保护与自噬通路的新机制

本研究针对癫痫治疗中药物可及性差和疗效有限的临床难题，创新性地探索了内皮祖细胞(EPCs)通过调控长链非编码RNA(lncRNAs)改善癫痫发作的分子机制。研究人员通过戊四氮(PTZ)诱导的大鼠癫痫模型，发现EPCs能显著降低癫痫发作程度，改善认知功能障碍，并上调Evf2、Pnky等关键lncRNAs表达。该研究为癫痫的干细胞治疗提供了新靶点，发表于《Journal of Zhejiang University-SCIENCE B》，具有重要转化医学价值。

　　

癫痫作为一种常见的神经系统疾病，全球约有5000万患者，其中近三分之一对现有抗癫痫药物(AEDs)反应不佳。更令人担忧的是，在发展中国家，由于药物可及性和经济负担等问题，治疗缺口高达75%。这种现状促使科学家们不断探索新的治疗策略。近年来，干细胞疗法因其独特的再生修复能力成为研究热点，而内皮祖细胞(EPCs)因其能穿越血脑屏障(BBB)并分泌神经营养因子的特性备受关注。与此同时，长链非编码RNA(lncRNAs)作为基因表达的"暗物质"，在神经系统发育和自噬调控中扮演关键角色，但其在癫痫中的作用尚不明确。Shimaa O. ALI团队正是基于这些科学问题，开展了一项创新性研究。

研究人员采用的主要技术方法包括：通过密度梯度离心法从大鼠骨髓中分离培养EPCs并用PKH26荧光标记；建立PTZ诱导的大鼠癫痫模型(35 mg/kg，每周3次，共9次)；采用Y迷宫和旷场实验(OFT)评估认知功能；通过ELISA检测血浆中S100B、NEFH等神经损伤标志物；利用RT-qPCR分析Evf2、Pnky等lncRNAs表达；采用免疫组化检测海马区VEGF表达。

研究结果部分显示：

1. 1.

   癫痫行为学改变：EPCs治疗组从第4次PTZ注射开始，癫痫发作严重程度评分显著低于PTZ组和丙戊酸(VPA)治疗组。在Y迷宫测试中，EPCs使自发交替百分比(SAP)提高2.3倍，同臂返回(SAR)减少58%，表明其能显著改善工作记忆障碍。

2. 2.

   神经损伤标志物变化：EPCs使血浆S100B水平降低59%，神经丝重链蛋白(NEFH)降低52%，热休克蛋白70(HSP70)降低40%，泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)降低34%，效果均优于传统药物VPA。

3. 3.

   lncRNAs表达调控：EPCs显著上调了癫痫大鼠中受抑制的lncRNAs，包括Evf2(6倍)、Pnky(42倍)、Dlx1(9倍)、APF(28倍)、HOTAIR(19倍)和FLJ11812(2倍)。这些lncRNAs与神经发育和自噬调控密切相关。

4. 4.

   血管新生作用：免疫组化显示EPCs使海马区VEGF表达增加232%，显著改善了PTZ引起的血管新生抑制。相关性分析发现VEGF与HOTAIR、Pnky呈显著负相关。

这项研究得出三个重要结论：首先，EPCs通过调控特定lncRNAs的表达网络，在PTZ诱导的癫痫模型中表现出优于传统药物VPA的治疗效果；其次，EPCs可能通过外泌体递送机制，影响受体细胞的基因表达模式；最后，该研究首次揭示了EPCs-lncRNAs-自噬通路在癫痫中的调控网络，为开发新型抗癫痫疗法提供了理论依据。

讨论部分强调了几个关键科学意义：在机制层面，EPCs可能通过"旁分泌-外泌体"双重作用机制，同时改善BBB完整性和神经元自噬功能；在转化医学层面，针对lncRNAs(如Evf2/Pnky)的干预策略可能成为药物研发新方向；在临床价值层面，这种基于干细胞的治疗方法有望解决当前AEDs存在的耐药性和可及性问题。值得注意的是，研究还发现EPCs对认知功能的改善作用独立于其抗癫痫效果，这为治疗癫痫共病认知障碍提供了新思路。