脂质纳米颗粒共递送多RNA实现CAR-T细胞精准基因编辑

为解决传统病毒载体递送CRISPR/Cas9系统导致的T细胞损伤问题，研究人员开发了新型脂质纳米颗粒(LNPs)技术，通过共递送CD19 CAR mRNA、Cas9 mRNA及PD-1 sgRNA，实现CAR-T细胞的高效基因编辑。该技术显著提升PD-1敲除效率(76%)，增强抗CD19+肿瘤活性，为开发更安全高效的CAR-T疗法提供新策略。

　　

过去十年间，嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法在血液肿瘤治疗中取得突破性进展，但传统病毒载体存在插入突变风险，且肿瘤微环境中PD-1/PD-L1免疫检查点通路严重制约疗效。研究团队创新性地采用脂质纳米颗粒(LNPs)作为递送载体，将CD19靶向的CAR mRNA、Cas9 mRNA及靶向PD-1的向导RNA(sgRNA)打包成"基因快递包裹"，成功实现T细胞的双重改造：既表达抗癌"导弹"CAR分子，又敲除免疫刹车PD-1基因。

与传统电穿孔(EP)方法相比，这种纳米颗粒递送系统展现出更高转染效率和细胞存活率。体外实验显示，经改造的PD-1^-/- CAR-T细胞能精准清除CD19⁺ Nalm-6肿瘤细胞，动物实验中抗肿瘤活性显著增强。更令人振奋的是，该平台可扩展至多重基因编辑——通过共递送靶向PD-1、TRAC和B2M的sgRNA，实现三重基因敲除，编辑效率分别达76%、86%和80%，犹如为T细胞装配了"多功能基因剪刀"。这项技术为下一代智能化CAR-T疗法开发开辟了新路径。