啮齿类动物脾脏交感神经支配的宏观与微观解剖学解析及其免疫调控意义

这篇综述系统阐述了啮齿类动物脾脏交感神经（TH+/NET+神经元）的多级解剖结构，从腹腔神经节（CG）胞体定位、脾神经（SpN）轴突走向到终末分支的三维分布。创新性整合神经元示踪（AAV1-CAG-TdTomato/氟金）、免疫荧光和全组织透明化技术，首次报道脾神经相关巨噬细胞（NAMs）的CD68+激活特性，为神经免疫调控（如胆碱能抗炎反射）提供精准解剖框架。

　　

啮齿类脾脏交感神经的解剖迷宫解密

宏观解剖导航

脾脏交感神经呈现独特的"三室结构"：胞体聚集于腹腔神经节（CG），轴突沿脾动脉形成脾神经（SpN）丛，终末分支呈羽状分布于脾实质。通过对比大鼠（训练模型）与小鼠的操作差异，研究团队建立标准化解剖流程：左腹侧切口暴露左肾后，在腹腔动脉与肠系膜上动脉间的主动脉周隙定位CG，其直径仅0.5-1mm需显微操作确认。脾神经的识别则依赖胰腺表面淋巴结群标记，追踪脾动脉首级分叉前的Y形结构。

微观架构革命

全组织透明化联合TH免疫标记首次揭示：CG神经元呈"葡萄串样"簇状分布，胞体直径20-50μm，延伸出轴突束（直径5-15μm）与微纤维（<2μm）。脾神经内发现CX3CR1^GFP+/CD68⁺的神经相关巨噬细胞（NAMs），LPS刺激后其溶酶体标记CD68面积增加37%（p<0.05），暗示其对炎症信号的快速响应。脾实质内交感终末呈现血管伴随性分布，白髓中央动脉周围形成"神经袖套"，红髓小动脉旁呈现点状TH⁺斑点。

神经环路验证

双模式示踪技术验证CG-脾脏连接：逆行示踪中脾实质注射氟金7天后，CG胞体出现金颗粒沉积（对照星状神经节阴性）；顺行示踪采用AAV1-CAG-TdTomato腹腔注射，2个月后脾脏出现特异性红色荧光纤维，投射密度达每mm² 8.3±1.2个分支点。值得注意的是，AAV1在CG神经元的转导效率达68%，为后续化学遗传学（如DREADDs）干预奠定基础。

跨物种启示

相比人类脾神经的单支长程分布，啮齿类脾动脉早期分叉导致神经丛更分散。猪模型显示全脾均匀神经支配，而人类仅门脉区富集TH⁺纤维。这种差异提示小鼠模型中脾神经刺激阈值（0.5-1.2mA）需谨慎外推至临床。

技术突破意义

该研究建立的"Freehand"注射法（误差<50μm）和三维重建方案，使深部CG的靶向干预成为可能。特别是发现NAMs的CD68动态变化，为理解交感神经-免疫对话中"第三要素"提供新视角，未来或可开发特异性调控NAMs的药物递送系统，精确操纵脾脏NE代谢通路。