绿色高效HPLC法测定眼用凝胶中视黄醇(VIT A)和生育酚(VIT E)的含量及稳定性研究

本研究针对眼用凝胶中维生素A(VIT A)和维生素E(VIT E)的检测难题，开发了一种快速、环保的稳定性指示HPLC方法。研究人员采用C18色谱柱和乙醇-水绿色流动相，实现了5-200 IU/mL VIT A和25-1000 μg/mL VIT E的精准测定，并通过MoGAPI(76)、AES(79)等评价体系验证了方法的生态友好性。该研究为眼科制剂质量控制提供了创新解决方案，兼具分析效能与环境可持续性。

　　

在眼科治疗领域，维生素A（视黄醇，VIT A）和维生素E（生育酚，VIT E）的组合制剂被广泛用于缓解干眼症状和保护视力。然而，现有检测方法普遍存在有机溶剂毒性大、分析时间长等问题，难以满足绿色化学的发展需求。更棘手的是，这两种脂溶性维生素在制剂中容易降解，常规方法无法有效区分活性成分与降解产物，给药品质量控制带来严峻挑战。

针对这些技术瓶颈，来自肇庆大学的Xiao-Chen Huang、Ahmed Sobhy Darwish等研究团队在《Talanta Open》发表了创新性研究成果。他们巧妙设计了一套"绿色化学"分析方案：采用Hypersil C18色谱柱(15 cm×4.6 mm, 5 μm)，以92%乙醇-8%纯水作为流动相，在290 nm波长下实现VIT A和VIT E的基线分离。该方法创新性地将传统分析技术与现代可持续理念相结合，不仅满足ICH（国际人用药品注册技术协调会）的严格验证要求，更通过多维度绿色评价体系证明了其环境友好特性。

研究团队运用三大关键技术：1）色谱条件优化系统考察了波长、柱温、流动相比例等参数；2）强制降解实验模拟酸、碱、氧化等极端条件验证方法特异性；3）采用MoGAPI、AGREE等新型评价工具量化方法的绿色程度。这些技术的综合应用确保了方法在分析性能与生态效益间的完美平衡。

【3.1 色谱条件优化】

通过系统筛选发现，290 nm检测波长可同时获得VIT A（保留时间8.50 min）和VIT E（3.33 min）的最佳响应。相比25 cm色谱柱，15 cm柱型将分析时间缩短40%且保持良好分离度（Rs=9.91）。突破性地采用乙醇替代传统有毒溶剂甲醇，在92%乙醇-8%水条件下获得对称峰形（拖尾因子T_f≤1.06）。

【3.2 方法验证】

线性范围覆盖VIT A 5-200 IU/mL（R²=0.9999）和VIT E 25-1000 μg/mL（R²=0.9997）。准确度试验显示回收率98.27%-101.98%，日内/日间精密度RSD%均<2%。强制降解实验证实方法可有效分离活性成分与降解产物，如在0.1 M NaOH处理后仍能准确测定44.12%的VIT A降解量。

【3.6 绿色评价】

该方法的生态优势通过多体系验证：MoGAPI评分76（满分100）、AGREE指数0.64（接近理想值1）、AES得分79（优秀级）。特别值得注意的是，其"白度"评分达95.8，显著高于文献报道方法（86.3），体现在红色（分析性能）、绿色（环保性）、蓝色（实用性）三方面的卓越平衡。

这项研究突破了传统药物分析方法的局限，首次建立了同时满足药典严苛要求与绿色化学原则的检测方案。其创新价值体现在：1）采用乙醇-水体系替代有毒溶剂，单次分析仅消耗3.68 mL乙醇；2）10分钟快速分析适合工业化质量控制；3）首创将白度评价应用于药物分析方法验证。这些成果不仅为眼科制剂质量监控提供了可靠工具，更为制药行业实施绿色分析化学树立了新标杆。未来，该技术框架可延伸应用于其他脂溶性维生素复方制剂的分析，推动药品质量控制向更高效、更可持续的方向发展。