基于顺序注射电化学检测的NADPH监测技术实现G6PD缺乏症的快速精准诊断

本文推荐一种结合顺序注射分析(SIA)与电化学检测(ECD)的创新方法，通过钴(II)酞菁(CoPc)修饰丝网印刷石墨烯电极(SPGE)实现NADPH的高灵敏度检测（线性范围10.0 μM-1.50 mM，检测限4.14 μmol L-1），为葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症筛查提供每小时120样本的高通量自动化解决方案，与标准分光光度法结果高度一致（回收率81.1%-107.7%）。

　　

Highlight

表面形态与CoPc/SPGE的电化学特性

通过扫描电镜(SEM)在1000倍放大下观察发现，未修饰的丝网印刷石墨烯电极(SPGE)呈现典型的石墨烯层状堆叠结构（图2A），而经钴(II)酞菁(CoPc)修饰后的电极表面均匀分布着棒状结构（图2B），能谱分析(EDS)证实了钴元素的存在。循环伏安(CV)测试显示，CoPc/SPGE在0.1 mol L^-1 Tris-HCl缓冲液(pH 8.0)中对NADPH的氧化峰电流显著增强，电子转移速率常数提升1.7倍，表明该修饰电极能高效催化NADPH的氧化反应。

结论

本研究成功开发出基于顺序注射电化学检测(SIA-ECD)的NADPH定量方法，具有宽线性范围（10.0 μM-1.50 mM）和优异的重复性（12次进样RSD=1.2%）。该系统每小时可处理120份样本，适用于G6PD缺乏症的快速筛查。通过对比6种突变样本发现酶活性范围为12.5±0.5%至50.8±3.0%，与标准分光光度法结果吻合。未来研究将聚焦于延长电极使用寿命，推动该技术在临床检验中的应用。