石仙桃中性杂多糖的结构表征及其通过屏障增强和肠道菌群调节对肠道炎症的保护作用

本研究首次从石仙桃（Pholidota chinensis Lindl.）中分离鉴定出中性杂多糖PCLP，通过核磁共振（NMR）、甲基化等分析揭示其以→4)-α-D-Glcp-(1→4)-β-D-Manp-(1→为主链的结构特征。在LPS诱导的IPEC-J2细胞和DSS诱导的小鼠结肠炎模型中，PCLP通过上调紧密连接蛋白（ZO-1/Claudin1/4/Occludin）保护肠屏障完整性，调节肠道菌群（增加有益菌/降低变形菌门），促进短链脂肪酸（SCFAs）生成，为开发替代抗生素的"绿色"饲料添加剂提供理论依据。

　　

Highlight亮点

本研究首次系统解析了石仙桃多糖（PCLP）的化学结构，并阐明其通过"肠屏障修复-菌群调节"双途径改善肠道炎症的新机制，为开发无抗生素饲料添加剂提供了创新性解决方案。

Chemical substances and agentia化学试剂

脂多糖（LPS）购自Sigma-Aldrich公司，CCK8试剂来自Apexbio。胎牛血清、PBS等细胞培养试剂购自Gibco，葡聚糖硫酸钠（DSS）来自大连美仑生物。抗体包括β-肌动蛋白（北京全金生物）、Claudin-4、ZO-1等。

Monosaccharide composition and ultraviolet spectrum analyses of PCLP单糖组成与紫外光谱分析

紫外光谱显示PCLP在260/280 nm无吸收峰，证实无核酸/蛋白污染（SFig.1）。HPLC-GPC测定其平均分子量为306 kDa（图2A-B）。单糖组成分析（图3A）显示甘露糖与葡萄糖摩尔比为0.793:0.207。

NMR spectroscopy and methylation–GC–MS analysis of PCLP核磁与甲基化分析

通过核磁共振（NMR）和甲基化-GC-MS技术，我们解析了PCLP的糖链信号特征，确认其主链为→4)-α-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-D-吡喃甘露糖-(1→结构，支链通过→4,6)-β-D-Manp-(1→O-6连接。

Discussion讨论

炎症性肠病（IBD）与肠屏障破坏、菌群失调及免疫异常密切相关。在畜牧业中，IBD导致增重缓慢、死亡率上升，严重影响经济效益。本研究首次证明PCLP通过三重机制发挥作用：①上调紧密连接蛋白（ZO-1/Claudins/Occludin）修复肠屏障；②调节菌群结构（增加厚壁菌门/拟杆菌门比值）；③促进短链脂肪酸（SCFAs）生成。这些发现为开发替代抗生素的植物源性饲料添加剂提供了重要依据。

Conclusion结论

PCLP能显著缓解结肠炎进展：在细胞层面提升存活率并增强紧密连接蛋白表达；在动物层面调节肠道菌群生态（增加有益菌/减少变形菌门）；同时促进短链脂肪酸（SCFAs）生成。这些特性使其成为极具潜力的"绿色"饲料添加剂候选物。