结核病治疗期间连续痰样本污染率研究：揭示培养转化监测中的关键影响因素

这篇研究通过纵向队列分析揭示了结核病(TB)治疗期间痰培养污染率动态变化（12.3%-36.9%），证实监督采样可降低74%污染风险（OR=0.26，P=0.048），并发现痰涂片阴性/少量时污染风险显著升高（OR=1.55-1.99）。研究为优化MGIT培养（Mycobacteria Growth Indicator Tube）和BSL-3实验室（Biosafety Level-3）标准操作提供了关键证据。

　　

ABSTRACT

痰培养是结核病(TB)诊断和治疗监测的金标准，但MGIT液体培养基易受微生物污染。研究表明，严格冷链和监督采样可降低污染率，但缺乏每周采样的纵向研究。本研究评估了样本采集至实验室处理时间、非监督采样与污染率的关系，并分析了治疗前12周的污染率变化及临床行为预测因素。从301名TB患者收集的3,155份痰样本显示，治疗初期污染率最低（12.3%），随后几周上升，第8周后稳定在30%左右。非监督采样在治疗初期（P=0.048）和12周内（P=0.028）污染风险更高，且涂片分级与污染风险呈负相关。

INTRODUCTION

痰培养作为结核分枝杆菌(Mtb)检测和药敏试验(DST)的首选方法，其敏感性依赖于样本质量。污染可能导致假阴性或不确定结果，增加医疗负担。研究强调，CFU（菌落形成单位）、TTP（阳性时间）和EBA（早期杀菌活性）等指标在污染样本中可能失效。尽管WHO建议严格冷链和48小时内处理，但实际操作因地区而异。美国CDC提出3-5%污染率为BSL-3实验室的基准，但在中低收入国家(LMICs)难以实现。

MATERIALS AND METHODS

研究纳入南非Worcester的301名TB患者，每周采集痰样本共3,155份。监督采样由工作人员指导完成，包括漱口和样本质量控制。样本通过冷链运输至BSL-3设施，采用NALC-NaOH去污和MGIT培养。污染定义为MGIT阳性但含污染物（与诊断标准不同）。统计分析采用逻辑回归和GEE模型，调整年龄、性别、HIV状态等变量。

RESULTS

污染率从治疗第1周的12.3%升至第11周的36.9%。监督采样显著降低污染（OR=0.79，P=0.031），涂片阴性/少量样本污染风险更高（OR=1.55-1.99）。治疗周数每增加一周，污染风险上升7%（P<0.001）。使用诊断标准时，HIV阳性成为新预测因子（OR=1.49，P=0.005）。

DISCUSSION

污染率随治疗时间增加，可能与Mtb负荷降低和口腔菌群引入有关。监督采样使初期污染风险降低74%，但后期仍需严格冷链。研究局限性包括未记录非监督采样的具体时间。结论强调监督采样对TB诊断和监测的价值，尤其在LMICs的社区采样场景中。

Conclusion

研究通过12周连续采样揭示了污染率动态变化，证实监督采样和涂片分级的关键作用，为优化TB监测项目提供了实践指导。