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噬菌体-IgG双识别系统:一种无需抗体的高效金黄色葡萄球菌捕获检测平台
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年09月01日 来源:Sensors and Actuators B: Chemical 8.0
编辑推荐:
【编辑推荐】本研究创新性地构建了基于猪IgG(免疫球蛋白G)和M13噬菌体的双识别系统,通过硼酸功能化磁性氮化碳纳米片(IgG-M-BCN)捕获金黄色葡萄球菌(S. aureus),利用噬菌体诱导金纳米颗粒(AuNPs)聚集产生表面等离子体共振(SPR)信号,实现4 CFU mL?1的超敏检测,突破了传统抗体夹心法(ELISA)的成本和交叉反应限制,为病原体检测提供了模块化技术平台。
Highlight亮点
本研究开发了一种无需配对抗体的创新检测系统,整合猪IgG的捕获能力和工程化M13噬菌体的信号放大功能,实现了金黄色葡萄球菌的高效富集与超灵敏检测。该系统突破传统免疫检测的局限性,为病原体诊断提供了全新范式。
材料与方法
M-BCN的制备
磁性氮化碳纳米片(M-BCN)通过我们课题组先前建立的 protocol 制备。将0.1 g BCN粉末分散于38 mL乙醇/水混合溶液中进行磁性纳米颗粒原位生长。经5小时超声处理后(800 W),加入0.12 g FeCl3·6H2O和0.047 g FeCl2·4H2O继续超声30分钟。随后加入2 mL氨水(28 wt%),100℃反应60分钟获得磁性BCN材料。
捕获探针的构建与表征
为构建金黄色葡萄球菌捕获探针,猪IgG通过硼酸酯键定点偶联在M-BCN表面。M-BCN的制备参照我们前期工作:通过微波法制备g-C3N4,经HATU/DIEA偶联4-羧基苯硼酸(4-CPBA)功能化后剥离获得BCN纳米片,平均粒径约200 nm。
结论
本研究建立的抗体free生物传感平台,通过IgG-M-BCN特异性捕获和噬菌体介导的AuNPs聚集实现金黄色葡萄球菌定量检测,具有101-107 CFU mL?1的宽线性范围和4 CFU mL?1的超低检测限。该模块化设计可通过更换捕获抗体和噬菌体适配其他病原体检测。
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