危重症患者中性粒细胞胞外囊泡通过单核细胞依赖性途径诱发肾内皮炎症：一项揭示急性肾损伤新机制的离体研究

本研究揭示了循环中性粒细胞胞外囊泡（NEVs）通过p38 MAPK通路激活单核细胞，促进肿瘤坏死因子-α（TNF-α）释放和内皮细胞粘附分子（E-Selectin/VCAM-1）表达，首次阐明NEVs携带的基质金属蛋白酶（MMP-8/9）在急性呼吸窘迫综合征（ARDS）相关急性肾损伤（AKI）中的关键作用，为靶向干预提供新思路。

　　

亮点解析

研究设计

我们通过"COVID-19多器官衰竭"研究获取样本（伦理批号20/NE/0153），对无行为能力的危重患者采用专业/亲属代理同意制，幸存者补充 retrospective consent（回顾性同意）。

胞外囊泡生产、分离与分析

采用大肠杆菌脂多糖（LPS）刺激健康志愿者全血产生EVs（具体方法详见补充表1）。

中性粒细胞胞外囊泡以单核细胞依赖性方式诱导内皮活化

实验显示，从LPS处理血液中分离的NEVs（1.0×10⁴ μl^-1）仅在与外周血单核细胞（PBMCs）共培养时，才能显著提升人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的E-选择素和血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）表达（图1a/b）。有趣的是，血小板EVs、NEVs洗涤上清液或CD66b免疫亲和珠均未产生类似效应。

讨论

我们首次完整描绘了NEVs引发微血管炎症的级联反应（图5）：NEVs被单核细胞内化→通过p38通路激活→释放大量TNF-α（676[474-1731] pg ml^-1 vs 对照27[18-29] pg ml^-1, P=0.003）→上调肾小球内皮细胞粘附分子（E-选择素中位荧光强度：NEVs组2960[2471-4991] vs 对照组931[881-1181], P=0.003）。特别值得注意的是，NEVs富含的MMP-8/9被证实是关键效应分子，其抑制剂（强力霉素/MMP特异性抑制剂）可阻断炎症反应。

结论

在急性呼吸窘迫综合征患者中，循环NEVs可能通过这种"单核细胞-内皮细胞对话"机制，成为连接全身炎症与急性肾损伤的重要桥梁。