靶向CD70的同种异体CAR-NKT细胞通过多模式作用机制治疗转移性肾细胞癌

本研究针对转移性肾细胞癌(mRCC)治疗面临的挑战，开发了一种新型的同种异体CD70靶向CAR-NKT细胞疗法(AlloCAR70-NKT)。研究人员通过造血干细胞和祖细胞(HSPC)工程化技术，成功构建了具有高纯度、无自相残杀风险的AlloCAR70-NKT细胞。该疗法不仅能通过CAR和自然杀伤受体(NKR)双重机制靶向肿瘤细胞，还能通过NKT细胞受体(TCR)识别免疫抑制性肿瘤微环境(TME)，并清除CD70+的同种异体反应性T细胞，显著提高了治疗效果和持久性。这项研究为mRCC提供了一种具有临床应用前景的"现货型"免疫治疗新策略。

　　

肾细胞癌(RCC)占肾脏恶性肿瘤的90%，其中30%-40%的患者会发展为转移性疾病。尽管现有治疗手段不断进步，但转移性肾细胞癌(mRCC)的治疗仍面临巨大挑战。传统的CD70靶向CAR-T细胞疗法虽然显示出一定潜力，但其自体来源特性导致的个性化制备过程复杂、耗时长、成本高，限制了广泛应用。此外，实体瘤的抗原异质性和高度免疫抑制的肿瘤微环境(TME)也影响了治疗效果。因此，开发一种能够同时靶向肿瘤细胞和TME的"现货型"高效细胞疗法成为当务之急。

在这项发表于《Cell Reports Medicine》的研究中，Yan-Ruide Li、Junhui Hu、Zhe Li等研究人员开发了一种创新的同种异体CD70靶向CAR-NKT细胞(^AlloCAR70-NKT)疗法。该研究通过临床导向的培养方法，从造血干细胞和祖细胞(HSPC)成功生成了这种新型细胞治疗产品。研究团队采用了一系列关键技术方法，包括：1)使用15例原发性RCC患者样本进行生物标志物分析；2)建立HSPC工程化技术平台生成^AlloCAR70-NKT细胞；3)构建多种体内外模型评估治疗效果，包括原代RCC患者来源的肿瘤细胞系、原位和转移性异种移植小鼠模型；4)采用3D组织成像技术分析细胞浸润情况；5)通过混合淋巴细胞反应(MLR)评估同种异体反应性。

研究结果部分，首先通过"原发性RCC患者样本分析揭示CAR-NKT细胞治疗潜力"的研究发现，CD70在RCC肿瘤细胞中高表达而在正常组织中几乎不表达，且RCC肿瘤细胞普遍高表达NK细胞激活配体。此外，RCC的TME富含肿瘤相关巨噬细胞(TAM)和髓系来源的抑制细胞(MDSC)，这些细胞高表达CD1d，可能成为NKT细胞的靶点。

在"生成高产、高纯度且无自相残杀风险的HSPC工程化^AlloCAR70-NKT细胞"部分，研究人员展示了一种五阶段临床导向的培养方法，能够在6周内从单个脐带血供体的CD34⁺ HSPCs中产生高达10¹²个^AlloCAR70-NKT细胞。这些细胞不表达CD70，避免了自相残杀和激活诱导的耗竭风险。

"^AlloCAR70-NKT细胞展现强大抗肿瘤活性和多种肿瘤靶向机制"的研究表明，与常规CAR70-T细胞相比，^AlloCAR70-NKT细胞不仅能通过CAR依赖的方式杀死CD70⁺肿瘤细胞，还能通过NKG2D和DNAM-1等自然杀伤受体(NKR)介导的机制杀伤CD70^-/low的肿瘤细胞，有效克服了肿瘤抗原异质性。

在RCC患者来源异种移植(PDX)模型中的研究显示，^AlloCAR70-NKT细胞表现出"卓越的抗肿瘤效果、肿瘤归巢能力和增强的效应功能"。与常规CAR70-T细胞主要聚集在外周淋巴器官不同，^AlloCAR70-NKT细胞优先归巢至肿瘤部位，并保持更强的激活和细胞毒表型。

特别值得注意的是，^AlloCAR70-NKT细胞能"有效靶向RCC TME，通过CD1d依赖性识别清除免疫抑制性TAM和MDSC"。在原发性RCC样本和786-O/TAM类器官模型中的实验证实，这些细胞能选择性清除CD1d⁺的免疫抑制细胞，同时保留其他免疫细胞。

此外，^AlloCAR70-NKT细胞还展现出"选择性靶向CD70⁺同种异体反应性T细胞"的能力，这不仅能减少宿主对治疗细胞的排斥反应，还能避免常规CAR-T细胞可能引发的移植物抗宿主病(GvHD)。

在安全性方面，与常规CAR70-T细胞相比，^AlloCAR70-NKT细胞诱导的细胞因子释放综合征(CRS)相关毒性显著降低，且未观察到明显的器官损伤。

这项研究的重要意义在于开发了一种具有多重优势的新型细胞治疗平台：1)克服了自体CAR-T细胞治疗的制备限制，提供"现货型