靶向内源性大麻素系统抑制TSC相关肾病中mTORC1过度激活的机制研究

这篇研究首次揭示结节性硬化症(TSC)相关肾病中存在内源性大麻素系统(ECS)显著失调，通过小鼠模型和CRISPR编辑的人肾细胞证实，Tsc1缺失导致大麻素受体CB1R上调和CB2R下调。研究发现外周CB1R拮抗剂JD5037能有效抑制mTORC1活性和c-Myc表达，为TSC肾病变提供了新的治疗靶点。

　　

引言

结节性硬化症(TSC)是一种由TSC1或TSC2基因突变引起的多系统疾病，约80%患者会出现肾脏病变。研究团队通过Six2 Cre^tg/+Tsc1^fl/fl小鼠模型和CRISPR编辑的HK2人肾小管上皮细胞，首次系统研究了内源性大麻素系统(ECS)在TSC相关肾病中的作用。

内源性大麻素及其代谢酶的改变

在胚胎期E18.5的Tsc1敲除(KO)小鼠肾脏中，LC-MS/MS检测发现2-AG水平显著降低，而AEA、OEA和AA水平升高。分子机制研究表明，脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)的mRNA和蛋白表达均上调，而NAPE-PLD蛋白表达下降。免疫荧光显示FAAH在囊肿衬里上皮细胞中表达增强，这种改变可能通过转录激活机制实现。

CB1R和CB2R表达的失衡

研究发现在Tsc1 KO肾脏中，CB1R编码基因Cnr1表达显著上调，而CB2R编码基因Cnr2表达下调。Western blot和免疫荧光证实CB1R蛋白在近端小管囊肿衬里细胞中过度表达，CB2R则表达降低。在TSC1敲除的人HK2细胞中也观察到相同的受体表达模式，说明这一机制在物种间具有保守性。

CB1R抑制的治疗潜力

使用外周限制性CB1R拮抗剂JD5037处理TSC1 KO的HK2细胞，发现能显著降低磷酸化S6(pS6)水平，表明mTORC1活性受到抑制。更重要的是，JD5037处理还降低了原癌基因c-Myc在mRNA和蛋白水平的表达。在离体培养的Tsc1 KO新生鼠肾脏中，JD5037处理24-48小时后，pS6信号明显减弱，而总S6蛋白保持不变。

讨论与展望

该研究首次阐明了ECS在TSC肾病中的关键作用：Tsc1缺失导致AEA代谢紊乱、CB1R/CB2R表达失衡，进而促进mTORC1过度激活。虽然CB1R拮抗剂显示出良好治疗效果，但研究者也指出，孕期使用CB1R拮抗剂可能导致早产等副作用，这为未来临床转化研究提出了新的挑战。研究结果为开发TSC肾病的新型靶向疗法提供了重要理论依据。