环状RNA RERE通过靶向PUM2促进UHRF1 mRNA降解降低Drp1启动子甲基化加剧心肌缺血/再灌注损伤

这篇研究揭示了环状RNA（circRERE）在心肌缺血/再灌注（I/R）损伤中的关键作用。通过靶向RNA结合蛋白PUM2，circRERE促进表观调控因子UHRF1的mRNA降解，从而降低线粒体分裂蛋白Drp1的启动子甲基化水平，导致线粒体动态失衡、线粒体自噬（mitophagy）受损及心肌细胞凋亡。该研究为心肌I/R损伤提供了新的治疗靶点。

　　

CircRERE的分子特性与表达调控

研究聚焦于环状RNA RERE（circRERE，mmu_circ_0001295/hsa_circ_0114356），其由RERE基因外显子3反向剪接形成，具有高度稳定性（抵抗RNase R降解）和胞质定位特征。在缺氧/再灌注（H/R）处理的AC16心肌细胞和原代小鼠心肌细胞中，circRERE表达显著上调，而敲低circRERE可减轻H/R诱导的活性氧（ROS）积累、乳酸脱氢酶（LDH）释放及线粒体膜电位（JC-1检测）下降，提示其参与线粒体功能障碍调控。

CircRERE-PUM2-UHRF1轴的作用机制

RNA免疫共沉淀（RIP）和pull-down实验证实，circRERE直接结合RNA结合蛋白PUM2，增强PUM2对UHRF1 mRNA的降解作用。过表达circRERE显著降低UHRF1 mRNA半衰期（Actinomycin D追踪实验），而PUM2敲除逆转此效应。UHRF1作为表观调控因子，其蛋白水平在H/R条件下降低，但通过circRERE敲除或UHRF1过表达可恢复，进而改善线粒体动态平衡。

表观遗传调控与线粒体功能紊乱

染色质免疫沉淀（ChIP）和甲基化特异性PCR（MSP）显示，UHRF1通过招募DNA甲基转移酶1（DNMT1）至Drp1启动子区，增强其甲基化水平，抑制Drp1表达。H/R导致Drp1启动子低甲基化和表达上调，伴随线粒体分裂相关基因（Fis1）升高、融合基因（OPA1/Mfn1/Mfn2）下调。电镜观察证实circRERE敲除减少线粒体碎片化，而UHRF1敲除抵消此保护作用。

线粒体自噬与细胞凋亡的调控

Western blot和免疫荧光显示，circRERE-UHRF1轴通过Drp1/PINK1/Parkin通路调控线粒体自噬。H/R抑制自噬标志物（LC3II/I、Beclin1）和线粒体定位的Parkin，而UHRF1过表达或Drp1敲除恢复自噬活性。流式细胞术证实circRERE敲低减少H/R诱导的心肌细胞凋亡（Annexin V-FITC/PI双染），且该效应依赖UHRF1-Dr