基于重组酶聚合酶扩增(RPA)联合侧向流试纸条(LFS)的十足目虹彩病毒1型(DIV1)快速可视化检测新方法

为解决对虾养殖中十足目虹彩病毒1型(DIV1)快速检测的需求，研究人员开发了重组酶聚合酶扩增(RPA)结合侧向流试纸条(LFS)的新型检测体系。该技术可在38°C恒温下18分钟完成基因扩增，3分钟实现可视化判读，灵敏度达1.12×101拷贝/μL，且与WSSV、IHHNV等常见病原体无交叉反应。经110份田间样本验证，其检测结果与WOAH推荐的qPCR完全一致，为水产病害防控提供了高效可靠的现场检测工具。

　　

十足目虹彩病毒1型(Decapod iridescent virus 1, DIV1)是威胁对虾和螃蟹养殖业的重大病原体。针对该病毒检测的迫切需求，这项研究创新性地将重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)技术与侧向流试纸条(Lateral Flow Strip, LFS)相结合。经过系统优化，该检测体系仅需在38°C恒温条件下反应18分钟即可完成目标基因扩增，配合LFS可在3分钟内实现肉眼判读结果。

该方法展现出卓越的特异性，与白斑综合征病毒(WSSV)、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)、桃拉综合征病毒(TSV)等常见水产病原体均无交叉反应，对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus, Vp_AHPND)也表现出良好区分度。灵敏度测试显示其最低检测限达1.12×10¹拷贝/μL。研究人员采用世界动物卫生组织(WOAH)推荐的qPCR方法作为金标准，对110份田间样本进行平行检测，结果完全一致，验证了该技术的可靠性。

这项突破性研究为水产养殖现场提供了一种操作简便、快速准确且无需复杂仪器的DIV1检测方案，对及时防控病毒性流行病暴发具有重要实践价值。