一种新型RP-HPLC方法用于药物制剂中达格列净、利格列汀和二甲双胍的同步测定

本研究开发并验证了一种简单、精确且具有稳定性指示功能的RP-HPLC方法，用于同步测定固定剂量复方片剂中的达格列净(DAPA)、利格列汀(LINA)和二甲双胍(MET)。研究人员通过优化色谱条件，解决了三种药物因极性差异(pKa值跨度达4-12.6)导致的分离难题，在Phenomenex Luna C18柱上实现10分钟内完全分离。方法验证显示线性范围优异(R2>0.995)，准确度达98.2-102%，并成功应用于商业制剂分析(回收率99.73-101.41%)。该研究为多药联用抗糖尿病制剂的质量控制提供了高效解决方案。

　　

在全球2型糖尿病(T2DM)肆虐的背景下，固定剂量复方制剂因能提高患者依从性而备受青睐。然而，达格列净(DAPA)、利格列汀(LINA)和二甲双胍(MET)这三种机制互补的抗糖尿病药物联用时，其质量监控面临巨大挑战——三者理化性质差异悬殊：MET是强极性分子(log P≈-1.5)，而DAPA(log P≈2.7)和LINA(log P≈1.9)则具有显著疏水性，传统分析方法难以实现同步检测。更棘手的是，现有唯一报道的HPLC方法存在耗时长、溶剂消耗大等缺陷。

这项发表在《BMC Chemistry》的研究突破性地建立了快速高效的检测方案。研究人员采用Phenomenex Luna C₁₈色谱柱(250×4.6 mm, 5 μm)，以乙腈-磷酸盐缓冲液(pH 6.8，含1 mL三乙胺)为流动相，在0.8 mL/min流速下，仅用12分钟便实现基线分离。创新性地引入三乙胺(TEA)作为改性剂，有效抑制碱性药物与硅醇基的相互作用，使LINA的峰对称因子优化至1.324。

关键技术包括：1）采用ICH Q2(R2)指南验证方法；2）强制降解实验评估酸/碱/氧化/光/热条件下的稳定性；3）系统适应性测试确保USP标准；4）商业片剂样本(n=20)分析验证实用性。

【方法开发与优化】

通过6轮条件筛选（表1），最终方案使MET、LINA、DAPA保留时间分别稳定在3.094±0.2、5.968±0.3和11.709±0.1分钟（图2）。理论塔板数均超2000，分辨率>1.5，完全满足USP要求。

【方法验证】

线性范围覆盖临床相关浓度：MET(20-140 μg/mL)、LINA(0.2-1.4 μg/mL)、DAPA(0.6-2.8 μg/mL)。LOD/LOQ显示超高灵敏度，如DAPA仅需0.16 μg/mL即可检出（表2）。日内/日间精密度%RSD<2%，加标回收率98.2-102%（表3-4）。

【强制降解研究】

在0.1 N HCl中60℃处理1小时，三种药物降解率均超13%（表5）。但方法仍能有效区分原药与降解产物（图4），峰纯度指数>0.998（图5），证明其稳定性指示能力。

【制剂分析】

商业片剂测定结果（MET 101.41%、LINA 100.04%、DAPA 99.73%）验证了方法的可靠性。

该研究创造了三项重要价值：首先，将分析时间缩短40%并减少溶剂消耗，更符合绿色化学理念；其次，首次建立同时覆盖三种药物降解产物的检测方案；最后，为复方制剂的质量标准制定提供了范式。如作者Samkit Shah1和RajendraKotadiya2?所述，这种方法特别适合监管机构对复杂制剂日益严格的审查需求。未来可进一步拓展至生物样本分析，助力个性化给药方案的优化。