基于PMAxx-IMS增强型实时PCR技术消除假阳性的大肠杆菌O157:H7快速灵敏检测新策略

本研究创新性地将改进型叠氮溴化丙锭（PMAxx）与免疫磁分离（IMS）技术相结合，建立了一种能在50分钟内特异性检测沙拉中活菌（≥104 CFU/g）的新方法。该技术通过PMAxx选择性阻断死菌DNA扩增，结合IMS去除残留染料和食物基质，不仅彻底消除了传统qPCR因死菌残留DNA导致的假阳性（100 CFU/g即误检），更将检测灵敏度提升1000倍，为食品微生物安全评估提供了革命性解决方案。

亮点

这项研究首次将增强型PMAxx处理与IMS技术联用，不仅能有效消除死菌导致的假阳性结果，还通过细菌分离富集显著提升检测灵敏度。

结论

PMAxx-IMS联合检测法通过双重机制革新了病原体检测：一方面利用PMAxx选择性标记死菌DNA（荧光强度610 nm）阻断扩增，另一方面通过抗体包被磁珠（IMS）快速富集目标菌并去除食物基质干扰。在人工污染沙拉的实验中，该方法成功将检测限从单独使用PMAxx时的10⁵-10⁶ CFU/mL提升至10⁴ CFU/g，且完全规避了传统qPCR在10⁰ CFU/g活菌背景下因10⁵ CFU/g死菌产生的假阳性。这种"双保险"策略为食品工业建立了新的安全标准，尤其适用于即食蔬菜等高风险食品的快速质控。