综述：可扩展且经济高效的CAR-T外泌体疗法：挑战与未来方向

本综述系统探讨了CAR-T细胞衍生外泌体（CAR-T exosomes）作为肿瘤治疗新策略的潜力。通过继承CAR（嵌合抗原受体）的靶向性和细胞毒性分子（如穿孔素、颗粒酶B），同时规避细胞因子释放综合征（CRS）等副作用，纳米级外泌体展现出优异的肿瘤穿透性和低免疫原性。文章重点分析了规模化生产瓶颈（如超速离心法UC的低产量）及联合免疫检查点抑制剂等突破免疫抑制微环境的前沿方案。

　　

ABSTRACT

嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法虽在血液肿瘤中取得突破，却在实体瘤治疗中面临浸润不足、细胞因子释放综合征（CRS）和毒性等挑战。CAR-T外泌体作为创新载体，完美继承了CAR的靶向识别功能与细胞毒性分子（如穿孔素perforin、颗粒酶B granzyme B），其纳米级尺寸显著提升肿瘤穿透效率，且因缺乏主要组织相容性复合体（MHC）而降低免疫原性，为"即用型"治疗奠定基础。

突破生产瓶颈：从超速离心到规模化

传统超速离心（UC）法存在设备昂贵、外泌体产量低（<1μg/10⁶细胞）和纯度波动等问题。新兴的微流控技术和尺寸排阻色谱法可将产量提升10倍，而聚合物沉淀法虽成本低廉却易引入杂质。冷冻-解冻循环联合挤压法能高效装载CAR-T细胞膜蛋白，使外泌体靶向效率提升83%。

联合治疗：破解免疫抑制微环境

针对肿瘤微环境（TME）的免疫抑制特性，CAR-T外泌体与PD-1/PD-L₁抑制剂联用可逆转T细胞耗竭。临床前研究显示，载有IL-12的外泌体能使肿瘤浸润CD8⁺T细胞增加5倍，而TGF-β siRNA修饰的外泌体可显著抑制调节性T细胞（Treg）活性。

临床转化挑战与展望

尽管GLP级生产标准下外泌体半衰期达48小时，但规模化工艺验证和稳定性仍是产业化的关键障碍。未来研究将聚焦于自动化生物反应器培养体系、外泌体表面工程化修饰（如CD47过表达逃逸巨噬细胞清除），以及基于人工智能的疗效预测模型构建。