7-氨基-4-甲基香豆素（AMC）作为PAS染色中希夫试剂的荧光替代物及其在树脂内关联光镜-电镜技术中的应用

研究人员开发了一种创新方法，利用7-氨基-4-甲基香豆素（AMC）的蓝色荧光特性替代传统希夫试剂，成功实现了对糖原和黏液的荧光标记，并应用于树脂内关联光镜-电镜技术（CLEM）。该技术在人结肠、肾脏病理样本及阿米巴结肠炎中验证了AMC对PAS阳性细胞（如杯状细胞、基底膜和阿米巴体）的精准示踪能力，显著提升了超薄切片中形态学关联分析的效率，为病理学电镜研究提供了新工具。

　　

周期性酸-希夫(PAS)染色是定位糖原和黏液的经典技术，而7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)这种有机试剂在紫外激发下会绽放蓝色荧光。最新研究发现，AMC能完美替代希夫试剂用于PAS染色，犹如给生物分子穿上了"荧光夜行衣"。更巧妙的是，当这项技术与树脂内关联光镜-电镜技术(CLEM)联姻时，能在同个环氧树脂包埋的超薄切片上，实现荧光信号与电镜超微结构的精准对焦。

研究团队选取了福尔马林固定的人结肠组织、肾脏样本以及阿米巴结肠炎病变，经过AMC染色后，这些样本像被施了"树脂封印术"般嵌入环氧树脂。令人振奋的是，结肠杯状细胞里的黏液、肾脏基底膜以及阿米巴原虫在树脂中依然保持着明亮的AMC荧光信号。特别是在炎症背景复杂的阿米巴结肠炎样本中，CLEM技术就像配备了"分子探照灯"，轻松捕捉到零星散落的阿米巴体。

这项突破不仅证实AMC是PAS染色的理想荧光替身，更开创了病理样本多尺度观测的新范式——从荧光标记的分子分布到电镜下的纳米级结构，所有信息都在同一张切片上完美呈现。对于需要精确定位病变的病理诊断而言，这无异于获得了"细胞级GPS导航系统"。