综述：树突状细胞来源的细胞外囊泡作为治疗性癌症疫苗：机制与优化策略

这篇综述系统阐述了树突状细胞外囊泡（DC-EVs）作为癌症疫苗载体的独特优势，包括其携带功能性肽-MHC复合物（pMHC）、共刺激分子和免疫调节因子的能力，以及通过间接、半直接和直接机制激活T细胞的特性。文章深入分析了当前临床疗效受限的关键因素（如免疫原性不足、淋巴靶向性差和肿瘤微环境抑制），并提出了优化策略（如新抗原优先、佐剂联用、EV工程化等），为下一代癌症疫苗开发提供了重要参考。

　　

细胞外囊泡的生物发生与分类

细胞外囊泡（EVs）是由脂质双层包裹的纳米颗粒，主要包括外泌体（30-150 nm）和微囊泡（100-1000 nm）。外泌体通过内体途径形成：多泡内体（MVE）中的腔内囊泡（ILVs）依赖ESCRT或非ESCRT机制组装，经Rab27a/b调控与质膜融合释放。微囊泡则通过质膜直接出芽形成，依赖ARF6诱导的肌动球蛋白收缩。这些EVs携带包括MHC分子、热休克蛋白、mRNA和miRNA等多样 cargo，其生物学功能与亲代细胞高度相关。

DC-EVs作为疫苗载体的理论基础

相比合成脂质纳米颗粒，DC-EVs具有天然生物相容性、循环稳定性及低免疫原性。其表面表达CD47（"别吃我"信号）和补体抑制剂（CD55/CD59）可逃避免疫清除。关键优势在于：

1. 1.

   高效递送：通过整合素、四跨膜蛋白（CD63/CD81）等介导靶向摄取，并能逃逸内体-溶酶体降解

2. 2.

   免疫激活：携带功能性pMHC-I/II复合物，可直接或通过"交叉修饰"（cross-dressing）激活CD8⁺/CD4⁺ T细胞

3. 3.

   组织趋向性：表面分子（如ICAM-1）促进与APCs/T细胞稳定免疫突触形成

抗原呈递的三大机制

间接机制：APCs内化抗原负载EVs后独立加工呈递

半直接机制（交叉修饰）：EVs将完整pMHC转移至APCs表面，利用宿主共刺激分子放大TCR信号。成熟DC来源的ICAM-1⁺ EVs效率提升50-100倍

直接机制：需EVs同时表达pMHC、CD80/CD86和ICAM-1，对初始T细胞激活较弱

临床转化挑战与优化策略

新抗原优先：早期临床试验靶向MAGE家族等肿瘤相关抗原（TAAs）疗效有限，应转向肿瘤特异性新抗原（如通过全外显子测序预测）

佐剂联用：TLR激动剂（如LPS）处理DCs可提升EVs中MHC和IL-12表达，miR-155递送促进T_H1极化

克服免疫抑制：PD-1⁺ EVs可能竞争性结合ICI，需联合PD-1/CTLA-4抑制剂

淋巴靶向优化：皮内或淋巴结内注射优于皮下途径，DEC-205抗体工程化增强DC靶向

生产工艺标准化：切向流过滤（TFF）联合尺寸排阻色谱（SEC）可提高EVs纯度和收率

未来展望

开发"现货型"通用DC细胞系（匹配HLA超型）、整合多组学新抗原预测平台、优化EVs冷冻制剂等将推动临床转化。通过模块化工程赋予EVs检查点抑制剂（如PD-1抗体）或细胞因子（IL-12）功能，有望突破现有肿瘤疫苗疗效瓶颈。