唾液RNA图谱解析：乳腺癌非侵入性诊断与预后监测的新型生物标志物研究

这篇综述创新性地探索了唾液RNA作为乳腺癌（BC）诊断、分型和预后监测的非侵入性生物标志物。研究通过高通量RNA测序技术，鉴定了包括mRNA、lncRNA、miRNA和snRNA在内的多组学特征，揭示了唾液转录组与肿瘤分子亚型（如HR+/HER2-、TNBC）、组织学分型（IDC/ILC/DCIS）及淋巴结转移（LN+）的显著相关性。关键发现包括：1）建立10个稳定表达的唾液内参基因（如MYT1L、NOP56）；2）发现58个BC特异性差异表达基因（如ASF1A、MIR197）；3）鉴定出与 Lum-A/Lum-B亚型相关的GRIA2、CLDN9等标志物；4）首次报道淋巴结转移相关唾液特征基因（SEPTIN9、KIF21A）。研究为开发便捷、低成本的乳腺癌筛查策略提供了全新视角，尤其适用于资源有限地区的精准医疗实践。

　　

唾液RNA景观特征解析：乳腺癌诊疗新维度的探索

研究设计与患者特征

研究团队通过前瞻性队列设计，收集40例乳腺癌患者和10例健康对照者的唾液样本，采用DNA Genotek专用管标准化采集流程。患者群体涵盖主要临床亚型：12例浸润性导管癌（IDC）、8例浸润性小叶癌（ILC）、6例混合型癌和8例导管原位癌（DCIS）。分子分型显示65%为激素受体阳性（HR+），包括15例Luminal A（Lum-A，Ki-67<15%）和11例Luminal B（Lum-B，Ki-67≥15%），另含3例HER2+和3例三阴性乳腺癌（TNBC）。年龄分布呈现典型乳腺癌发病曲线，确诊高峰位于50-70岁区间。

稳定表达基因的发现与验证

通过全转录组测序，研究者首次系统鉴定了3048个在唾液样本中稳定表达的基因。其中MYT1L、NOP56和MUC5AC在独立验证队列（n=32）中表现卓越，跨组变异系数（CV）<15%，可作为理想的内参基因。值得注意的是，MUC5AC作为黏膜防御蛋白，其稳定性提示唾液上皮屏障完整性可能影响RNA释放机制。

乳腺癌特异性唾液标志物

差异表达分析（FDR<0.05，log₂FC>2）揭示58个显著上调的BC相关基因，包括：

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  染色质调节因子ASF1A（在TCGA数据集中与不良预后相关）

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  促癌miRNA MIR197（通过抑制TIMP3促进EMT）

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  长链非编码RNA PELO-AS1（在卵巢癌中证实可激活Wnt通路）

共表达网络分析识别出四个功能模块：

1. 1.

   miRNA模块（如MIR374A/MIR425）

2. 2.

   snoRNA模块（SNORD95/SNORD121A）

3. 3.

   基因调控模块（LINC02901/PSMC5）

4. 4.

   lncRNA模块（DPP10-AS1/PDK1-AS1）

组织学分型标志物的突破

研究首次建立组织学特异性唾液标志物组合：

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  IDC特征基因：MUC16（CA125编码基因）在独立验证中表达量较对照高4.3倍（P=0.0097），与肿瘤组织数据高度一致

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  ILC特征基因：组蛋白去乙酰化酶HDAC3和紧密连接蛋白ZAN，在TCGA的ILC队列中特异性高表达

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  DCIS特征基因：基底膜成分LUM和粘附分子KIRREL2

分子分型与预后价值

在HR+亚型中，Lum-A特有的GRIA2（谷氨酸受体）和ROGDI（氧化应激响应因子）与良好预后相关，而Lum-B特征基因CLDN9（紧密连接蛋白）和FOXM1（细胞周期调控因子）在KM生存分析中高风险比达2.18（FDR<10%）。淋巴结转移（LN+）患者唾液中发现10基因特征信号，其中SEPTIN9（细胞骨架调节）和DTYMK（核苷酸代谢）在转移灶中表达较原发灶升高1.02倍（P=4.32e-96）。

治疗监测与前沿发现

15例患者的1年随访数据显示，化疗后唾液miRNA谱发生显著变化：

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  促凋亡miR-34a表达下降72%

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  血管生成抑制因子miR-15a降低58%

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  EMT相关基因CALD1下调3.1倍

研究还鉴定出89个新型Ensembl注释基因，其中16个特异性富集于ILC患者，为后续机制研究提供全新靶点。

这项研究构建了唾液RNA在乳腺癌诊疗中的多维应用框架，从早期筛查到疗效监测，展现出替代传统组织活检的潜力。特别在资源匮乏地区，基于唾液的"液体活检"可能成为改变诊疗范式的突破性技术。