DMBA诱导仓鼠口腔鳞癌模型中Th1/Th2与Th17/Treg免疫平衡偏移的机制研究

本研究针对口腔鳞状细胞癌(OSCC)恶性转化过程中免疫微环境动态失衡的科学问题，通过建立7,12-二甲基苯并蒽(DMBA)诱导的叙利亚仓鼠颊囊癌模型，首次系统揭示了从正常黏膜→口腔潜在恶性病变(OPMDs)→OSCC进程中Th1/Th2向Th2偏移、Th17/Treg向Treg倾斜的免疫失衡规律。研究采用流式细胞术动态监测CD4+T细胞亚群变化，发现Th1/Th2比值降低促进癌变发生，Th17/Treg比值降低驱动恶性转化，为OSCC免疫干预提供新靶点。成果发表于《BMC Oral Health》。

　　

口腔鳞状细胞癌(OSCC)作为头颈部最常见的恶性肿瘤，每年全球新增病例超过30万例。其典型特征是从正常黏膜经口腔潜在恶性病变(OPMDs)逐步恶变的病理过程。尽管已知免疫微环境在肿瘤发展中起关键作用，但关于Th1/Th2和Th17/Treg这两组关键免疫平衡在OSCC恶性转化中的动态变化规律，长期以来缺乏系统研究。这严重制约了针对癌前病变的免疫干预策略开发。

为解决这一科学问题，吉林大学口腔医院的Qi Shao、Hongyuan Li和Yuanye Tian团队创新性地采用经典的致癌剂DMBA诱导叙利亚仓鼠颊囊癌模型，完美模拟人类OSCC从正常黏膜→OPMDs→浸润癌的渐进过程。研究通过每周肉眼观察和每四周活检确认，在8周和16周分别成功建立OPMDs（高级别上皮异常增生）和OSCC模型。

研究采用流式细胞术这一核心技术，动态分析不同病变阶段CD4⁺T细胞亚群变化。实验设计严谨，设置空白对照（无处理）、阴性对照（丙酮处理）、OPMDs组和OSCC组，每组10只SPF级叙利亚仓鼠。通过机械研磨法制备单细胞悬液，分别标记Th（Th1/Th2/Th17）和Tr（Treg）检测管，使用Percp-cy5.5标记IFN-γ（Th1）、PE标记IL-4（Th2）、Alexa fluor 647标记IL-17a（Th17），以及PE-CD25与Alexa fluor 647-Foxp3双标（Treg），最终通过FlowJo_V10软件分析数据。

研究结果

病理学变化：

DMBA处理组呈现典型的恶性转化进程：8周时黏膜增厚呈白斑样改变，病理显示上皮异常增生；16周出现外生性肿瘤，组织学证实为浸润性鳞癌。空白组和阴性对照组黏膜保持正常结构。

Th1/Th2平衡动态：

• Th1（CD4⁺IFN-γ⁺）在正常黏膜→OPMDs阶段显著降低（P<0.01），OPMDs→OSCC阶段下降趋缓

• Th2（CD4⁺IL-4⁺）在OPMDs→OSCC阶段显著升高（P<0.05）

• Th1/Th2比值随病变进展持续降低，提示免疫应答向Th2型漂移促进癌变

Th17/Treg平衡动态：

• Th17（CD4⁺IL-17a⁺）在正常黏膜→OPMDs阶段急剧减少（P<0.01）

• Treg（CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺）在整个癌变过程中持续增加（P<0.05）

• Th17/Treg比值在OPMDs阶段出现特征性降低，但在OPMDs→OSCC阶段意外回升

结论与意义

该研究首次完整描绘了OSCC发生发展中Th1/Th2和Th17/Treg双平衡的动态变化图谱：

1. 1.

   Th1/Th2向Th2偏移主要发生在OPMDs→OSCC阶段，提示Th2型免疫应答优势可能驱动恶性转化

2. 2.

   Th17/Treg向Treg倾斜主要出现在正常黏膜→OPMDs阶段，表明免疫抑制微环境的建立是癌前病变的关键特征

3. 3.

   发现Th17/Treg比值在OPMDs→OSCC的异常回升现象，为解释部分OPMDs自发消退提供了新视角

这项发表于《BMC Oral Health》的研究不仅为OSCC的免疫逃逸机制提供了实验依据，更开创性地提出：针对不同癌变阶段的特异性免疫平衡干预策略——在OPMDs阶段纠正Th17/Treg失衡可能阻止恶性转化，而在OSCC阶段调节Th1/Th2平衡或可抑制肿瘤进展。这些发现为开发OSCC免疫预防和治疗新方法奠定了重要理论基础。