SDS-EDTA处理色谱纸片在猴痘病毒及疱疹病毒采样运输中的应用评估与诊断突破

本研究针对猴痘病毒(MPXV)及疱疹病毒(VZV/HSV)诊断中样本运输与保存的难题，开发了一种基于SDS-EDTA处理的色谱纸片采样技术。研究人员通过模拟不同温度(-20℃至37℃)和存储时长(1-120天)条件，证实该技术可稳定检测低至2 copies/μL的MPXV及其他病毒核酸，解决了资源有限地区冷链运输的瓶颈问题。这项发表于《Virology Journal》的成果为热带病现场诊断提供了经济高效的解决方案。

　　

近年来，猴痘病毒(MPXV)在非洲 endemic regions（地方性流行区域）和非 endemic regions（非地方性流行区域）的反复暴发，暴露了现有诊断体系的重大缺陷。这种以发热、皮疹为特征的 zoonotic disease（人畜共患病），其临床表现极易与带状疱疹病毒(VZV)、单纯疱疹病毒(HSV-1/HSV-2)感染混淆。更严峻的是，根据联合国危险品运输条例，MPXV样本属于UN2814类高危传染物，必须通过三重包装在冷链条件下运输——这对基础设施薄弱的 rural areas（农村地区）无异于天堑。当样本因运输延误导致核酸降解时，误诊和漏诊将成为疫情防控的致命漏洞。

KU Leuven大学的 Nikola Sklenovska 团队独辟蹊径，将原本用于肠道病毒检测的 SDS-EDTA 色谱纸片技术创造性应用于疱疹病毒科。这项发表于《Virology Journal》的研究揭示：经过十二烷基硫酸钠(SDS)和乙二胺四乙酸(EDTA)处理的 Whatman 17 Chr 色谱纸，不仅能彻底灭活病毒（通过 BSL-3 实验室验证），还可将病毒核酸在 37℃高温下稳定保存120天。研究人员采用梯度稀释法（10^-2-10^-5）测试了 MPXV、VZV、HSV-1/HSV-2 四种病毒，配合自动化核酸提取(MagMAX Viral/Pathogen Kit)和实时荧光定量PCR(qPCR)技术，证实该体系对低至2 copies/μL的 MPXV 仍保持100%检出率——这远低于皮肤病灶中10⁹-10¹² copies/μL的病毒载量阈值。

病毒灭活验证

通过 HEL-299 和 E1SM 细胞系培养实验证实，经 SDS-EDTA 处理的纸片可使病毒滴度下降≥1000倍，完全消除感染风险，同时未处理的对照组出现典型 cytopathic effect（细胞病变效应）。

温度稳定性测试

如图1数据所示，在-20℃至37℃全温度范围内，所有病毒稀释度(10^-2-10^-5)的Ct值保持线性关系（R²>0.98）。仅有两例HSV在极限稀释度出现假阴性，经复测确认属 pipetting error（移液误差）。

成本效益分析

每片处理纸成本仅0.1欧元，单个技术人员1小时可制备280片，且无需冷链运输。相比传统病毒运输培养基(UTM)方案，可降低90%的物流成本。

这项研究从根本上重构了热带病毒病的诊断范式。其创新性体现在三方面：首先，SDS-EDTA 双缓冲体系通过蛋白变性(SDS)和核酸酶抑制(EDTA)的协同作用，同时实现生物安全与核酸稳定的"一石二鸟"；其次，该方法首次实现 MPXV 与 HSV/VZV 的同步检测，解决了临床鉴别诊断痛点；最重要的是，其卓越的高温稳定性使样本能在撒哈拉以南非洲等地区安全转运，为 WHO 提出的"最后一公里诊断"提供了技术支点。正如作者强调，这项技术可立即应用于当前 MPXV 暴发的现场筛查，其设计理念更可为其他高风险病原体的检测提供普适性方案。