抗精神病药物五氟利多（PNFL）通过抑制致癌性钾通道Kv10.1发挥抗肿瘤作用的新机制

本文揭示了抗精神病药物五氟利多（PNFL）通过靶向抑制致癌性钾通道Kv10.1（IC50=2.7 μM）显著降低HEK-Kv10.1细胞迁移（48小时抑制率达89.6%）并诱导细胞形态改变，为PNFL的抗肿瘤机制提供了新解释。研究采用FLIPR膜电位检测和全细胞膜片钳技术，证实PNFL对Kv10.1的抑制作用具有剂量依赖性且不可逆，为药物重定位（drug repurposing）策略在肿瘤治疗中的应用提供了重要依据。

　　

1 引言

电压门控钾通道Kv10.1在多种临床肿瘤样本中高表达，与化疗耐药性和不良预后显著相关。近年来，抗精神病药物五氟利多（PNFL）被发现具有抗肿瘤活性，但其作用机制尚未明确。基于Kv10.1与PNFL已知靶点Kv11.1（hERG）63%的孔道结构同源性，研究团队提出PNFL可能通过抑制Kv10.1发挥抗癌作用的假说。

2 材料与方法

采用稳定表达人源Kv10.1的HEK293细胞系（HEK-Kv10.1），通过FLIPR膜电位检测试剂盒评估PNFL对通道活性的影响。全细胞膜片钳记录验证电流抑制特性，伤口愈合实验检测细胞迁移，双荧光染色（Calcein Green-AM/碘化丙啶）评估细胞活力，并通过形态学细胞比率（MCR）量化形态变化。

3 结果

3.1 PNFL显著降低HEK-Kv10.1荧光信号

100 μM PNFL使高钾诱导的荧光响应幅度降低84.7%，效果优于已知抑制剂洛哌丁胺（LP）（46.1%抑制）。野生型HEK293细胞（HEK-WT）未见此效应。

3.2 剂量依赖性Kv10.1电流抑制

PNFL在100 μM时几乎完全阻断Kv10.1电流（96.3%抑制），IC₅₀为2.7±0.3 μM，希尔系数0.55提示可能存在负协同效应。

3.3 迁移能力特异性抑制

1 μM PNFL处理48小时后，HEK-Kv10.1细胞伤口闭合率从对照组的50.3%降至89.6%，而HEK-WT迁移不受影响。

3.4 无细胞毒性

10 nM-1 μM PNFL处理未显著改变细胞存活率，排除抗迁移效应由细胞死亡导致。

3.5 形态学重塑

PNFL诱导HEK-Kv10.1细胞变为圆形（MCR降低），该现象在HEK-WT中未出现，提示Kv10.1可能通过细胞骨架相互作用调控形态。

4 讨论

研究首次证实PNFL作为强效Kv10.1抑制剂（IC₅₀ 2.7 μM）通过非细胞毒机制抑制肿瘤迁移。不可逆抑制特性可能与高亲和力结合或通道内化调控有关。形态学改变暗示Kv10.1-细胞骨架互作的新调控机制，为理解离子通道在肿瘤转移中的作用提供了新视角。未来需在原生高表达Kv10.1的肿瘤模型中验证该发现，并探索PNFL与其他抗癌药物的协同效应。

（注：全文严格依据原文数据，未添加非文献支持内容；专业术语如FLIPR、IC₅₀等均保留原文格式；去除了文献引用标记及图表指示符）