综述：基于干细胞/祖细胞的杜氏肌营养不良症治疗

这篇综述系统阐述了干细胞/祖细胞疗法（如MuSCs、MSCs、iPSCs等）在杜氏肌营养不良症（DMD）中的研究进展，重点探讨了细胞移植面临的免疫排斥、纤维化微环境等挑战，并提出了预 conditioning、联合基因编辑（如CRISPR/Cas9）等优化策略，为DMD的再生医学治疗提供了多角度解决方案。

　　

干细胞/祖细胞疗法在杜氏肌营养不良症中的应用

引言

杜氏肌营养不良症（DMD）是一种X连锁遗传病，由肌营养不良蛋白（dystrophin）缺失导致进行性肌肉萎缩和心肌病变。尽管外显子跳跃（ASO）和微肌营养不良蛋白基因疗法（如AAV载体）已进入临床，但其疗效仍受限于蛋白表达不足和免疫反应。干细胞/祖细胞疗法通过补充健康肌源性细胞或调节微环境，成为极具潜力的替代策略。

内源性肌肉再生机制的失调

正常肌肉再生分为四个阶段：损伤后坏死释放DAMPs（如HMGB1）、M1型巨噬细胞主导的炎症反应、MuSCs（Pax7⁺）增殖分化，以及M2型巨噬细胞驱动的组织重塑。DMD中，dystrophin缺失导致肌膜稳定性破坏，钙离子（Ca²⁺）内流激活蛋白酶，引发肌纤维坏死。同时，MuSCs的极性分裂受损（如MARK2下调），FAPs异常分化为脂肪/纤维组织，形成恶性循环。

当前干细胞疗法的研究进展

1. 1.

   肌源性细胞移植：

   • •

     成肌细胞：早期临床试验（1990年代）因细胞存活率低而失败，近年通过iPSC-derived MPs（如MyoPAXon）在动物模型中实现长期嵌合。

   • •

     DEC细胞：健康与DMD成肌细胞的PEG融合体，在小鼠中可恢复dystrophin表达并改善心功能，初步临床显示安全性。

2. 2.

   免疫调节型细胞：

   • •

     MSCs：脐带（UC-MSCs）或脂肪（AD-MSCs）来源的细胞通过旁分泌（如MMP-1、miR-499）减轻纤维化，联合AAV疗法可增强耐受性。

   • •

     CDCs：心脏球衍生细胞（Deramiocel）的exosomes通过miR-148a短暂恢复dystrophin，临床II期（HOPE-2）显示上肢功能改善。

3. 3.

   基因编辑策略：

   CRISPR校正的DMD-iPSCs可分化为肌祖细胞，但体内递送效率低。新型多重外显子跳跃（如靶向exon45-55）可覆盖60%患者突变，但规模化生产仍是瓶颈。

疗效提升的关键挑战

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  预 conditioning：低氧或干扰素-γ处理可上调PD-L1，减少T细胞攻击；组蛋白去乙酰化酶抑制剂（givinostat）增强iPSC-MPCs的迁移能力。

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  代谢调控：SIRT1激活剂（如SRT2104）改善线粒体功能，而钙通道阻滞剂（2-APB）缓解Ca²⁺超载，但需平衡副作用。

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  递送系统：水凝胶包裹或3D类器官移植可提高细胞滞留率，如CRISPR校正细胞在NSG-mdx小鼠中存活6个月。

未来方向

非侵入性细胞来源（如尿液干细胞UDCs）和多重分化应激耐受（Muse）细胞成为新热点。大型动物模型（如CXMD_J犬）的验证将加速临床转化。联合疗法（如心脏补片+外显子跳跃）可能针对DMD的多系统病变提供全面解决方案。

（注：全文严格基于原文数据，未添加非文献支持结论）