C/EBPβ缺失通过调控I型干扰素和TNF反应增强UVB诱导DNA损伤后的角质形成细胞凋亡

这篇研究揭示了转录因子C/EBPβ在紫外线B（UVB）辐射后调控角质形成细胞凋亡的新机制。通过RNA测序和通路分析发现，C/EBPβ?/?细胞中I型干扰素（IFN-I）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）信号通路异常激活，导致caspase-8和tBid介导的外源性凋亡增强。研究证实干扰素α/β受体（IFNAR1）和激酶Tyk2的抑制可显著减少细胞死亡，为紫外线相关皮肤疾病治疗提供了新靶点。

　　

C/EBPβ缺失增强角质形成细胞对UVB诱导凋亡的敏感性

研究发现，敲除C/EBPβ的小鼠角质形成细胞在UVB辐射后表现出显著的凋亡增强现象。通过流式细胞术检测发现，C/EBPβ siRNA转染的细胞中Annexin V+/PI-细胞比例增加2倍以上。Western blot分析进一步显示，这些细胞中cleaved caspase-3的激活呈现剂量依赖性，且在较低UVB剂量（10 mJ/cm²）下即可诱导明显凋亡。泛caspase抑制剂Z-VAD（OMe）-FMK能完全阻断这种凋亡，证实了caspase依赖性凋亡通路的激活。

外源性凋亡通路的关键调控机制

深入机制研究表明，UVB处理的C/EBPβ缺陷细胞中caspase-8的活化形式p18显著增加。同时发现促凋亡蛋白Bid被大量剪切为tBid，而通过siRNA敲低Bid或使用tBid抑制剂BI-6C9均可显著抑制caspase-3的活化。这些结果揭示了C/EBPβ通过调控caspase-8/Bid轴来抑制外源性凋亡通路的重要作用。

I型干扰素通路的异常激活

RNA测序分析显示，C/EBPβ^?/?细胞中有1732个差异表达基因，其中I型干扰素反应通路（Hallmark Interferon Alpha response）是最显著富集的通路。干扰素刺激基因（ISGs）如Xaf1、Isg15等表达显著上调。功能实验证实，敲除IFNAR1或使用Tyk2抑制剂BMS986165能显著降低ISGs表达并减少细胞凋亡，说明IFN-I信号在C/EBPβ调控的凋亡中起关键作用。

TNF-α介导的协同致死效应

Ingenuity通路分析将TNF-α列为最重要的上游调控因子。实验数据显示，C/EBPβ缺陷细胞中Tnfα mRNA水平增加3倍，分泌型TNF-α蛋白增加2.5倍。使用TNF-α中和抗体可显著抑制凋亡，而Tyk2抑制剂也能降低TNF-α表达，提示IFN-I和TNF-α信号存在交叉调控。这种协同作用可能通过上调Xaf1等促凋亡ISGs来增强死亡受体信号。

研究意义与转化价值

该研究阐明了C/EBPβ在UVB应激下平衡细胞存活与死亡的双重调控机制：既抑制IFN-I通路的过度激活，又负调控TNF-α介导的外源性凋亡。这一发现为理解紫外线诱发的皮肤损伤（如光老化、皮肤癌）和自身免疫性疾病（如红斑狼疮）的发病机制提供了新视角。特别是Tyk2和IFNAR1作为潜在治疗靶点，为开发新型光防护策略和抗炎药物指明了方向。研究还提示，在肿瘤治疗中调控C/EBPβ表达可能通过激活"非经典"DNA损伤反应来增强肿瘤细胞对放射治疗的敏感性。