黄热病疫苗YFV-17D诱导的T细胞交叉免疫对登革热病毒DENV-2感染的保护作用及机制研究

本研究针对黄热病疫苗(YFV-17D)是否通过交叉免疫机制保护登革热病毒(DENV-2)感染这一科学问题，通过小鼠模型揭示了YFV-17D免疫可显著降低DENV-2病毒血症和疾病严重程度。研究发现这种保护作用由异源T细胞免疫而非交叉中和抗体介导，为开发广谱抗黄病毒疫苗提供了新思路。

　　

在热带和亚热带地区，黄病毒属(Orthoflavivirus)成员如黄热病毒(YFV)、登革热病毒(DENV)、寨卡病毒(ZIKV)等常呈现共循环传播。这些病毒具有高度抗原相似性，使得先前感染或疫苗接种诱导的免疫反应可能对后续异种病毒感染产生双向调节作用——既可能通过交叉免疫提供保护，又可能通过抗体依赖性增强(ADE)加重疾病。非洲地区广泛接种的减毒黄热病疫苗YFV-17D已使用80余年，但其对其他黄病毒感染的免疫调节作用尚不明确。

针对这一科学问题，Prince Baffour Tonto等研究人员在《Communications Biology》发表研究，利用IFNAR1^-/-小鼠模型系统评估了YFV-17D预免疫对DENV-2感染的保护效果及机制。研究采用双次皮下免疫方案，通过病毒载量检测、体重监测、临床症状评分等指标评估保护效果；运用微量中和试验、Western blot和流式ADE实验分析抗体反应；通过T细胞耗竭实验和CFSE标记的细胞毒性测定揭示免疫机制。

主要技术方法

研究使用IFNAR1^-/-小鼠建立YFV-17D免疫和DENV-2攻击模型；通过定量RT-PCR检测病毒RNA载量；采用流式细胞术分析CD4⁺/CD8⁺T细胞应答；利用LFn融合蛋白技术递送全长病毒蛋白刺激T细胞；进行体内T细胞耗竭和细胞毒性实验验证功能机制。

Pre-existing YFV-17D immunity provides protection against DENV-2 infection

实验显示YFV-17D免疫组小鼠感染DENV-2后体重损失显著减少(3.5% vs 13%)，病毒载量降低10倍，全部存活且无临床症状，而对照组死亡率达25%。证明YFV-17D免疫确实能交叉保护DENV-2感染。

YFV-17D-specific antibodies do not neutralize nor enhance DENV-2 infection in vitro

中和实验发现YFV-17D抗体仅对同源病毒有效，对DENV-2无中和作用；虽能结合DENV E蛋白，但体外ADE实验显示不增强DENV-2感染。然而被动转移实验揭示这些抗体在体内可通过非经典途径增强DENV-2感染。

YFV-17D-specific T cells cross-react with DENV antigens

通过LFn蛋白刺激发现，YFV-17D特异性T细胞对DENV NS3/NS5蛋白产生强烈交叉反应(60-64%同源性)，而对结构蛋白反应较弱，表明交叉免疫主要针对保守的非结构蛋白。

YFV-17D-specific CD4⁺ and CD8⁺ T cells contribute to cross-protection

T细胞耗竭实验显示，CD8⁺T细胞缺失使病毒载量回升至 naive 水平，并重现疾病症状；CFSE细胞毒性实验证实YFV-17D特异性T细胞能有效杀伤DENV NS3/NS5脉冲细胞(杀伤率42-44%)。

Long-term immunity from a single immunization dose

单剂免疫30天后仍能提供完全保护，与当前CDC推荐的疫苗接种策略相符，具有临床转化意义。

这项研究首次系统阐明YFV-17D通过T细胞而非抗体途径交叉保护DENV-2感染的机制，为解释非洲地区黄病毒感染症状较轻的现象提供了科学依据。更重要的是，该发现为设计新型广谱黄病毒疫苗提供了重要思路——应注重诱导针对保守非结构蛋白(如NS3/NS5)的T细胞应答。尽管存在IFNAR1^-/-小鼠模型与人体差异等局限，但研究揭示了异源T细胞免疫在控制黄病毒感染中的核心作用，对公共卫生策略制定具有指导价值。