棕榈酸修饰纳米乳剂实现抗原交叉呈递与STING通路级联激活的肿瘤免疫治疗新策略

本研究针对亚单位疫苗（subunit vaccine）因抗原交叉呈递（cross-presentation）效率低和免疫激活不足导致的细胞免疫应答薄弱问题，开发了基于人血清白蛋白（HSA）的脂肪酸修饰纳米乳剂（NEs）。通过系统筛选发现棕榈酸修饰的16a-HSA NEs具有内源性佐剂特性，能实现从淋巴结到抗原呈递细胞（APCs）再到内质网（ER）的级联靶向递送，协同STING激动剂diABZI显著增强CD8+ T细胞应答和长效抗肿瘤效果。该研究为下一代疫苗设计提供了安全高效的递送平台。

　　

当前肿瘤疫苗研发面临两大瓶颈：一是亚单位疫苗（如重组蛋白）虽安全性高但免疫原性弱，难以有效激活细胞免疫；二是抗原与佐剂的共递送系统常因靶向不精准导致STING（stimulator of interferon genes）通路激活不足或脱靶毒性。如何实现从组织到细胞器层面的精准递送，成为突破疫苗效力的关键科学问题。

为攻克这一难题，四川大学华西药学院张韵、龚涛团队在《Bioactive Materials》发表研究，创新性地构建了脂肪酸修饰的人血清白蛋白（HSA）纳米乳剂（NEs）平台。研究通过系统筛选9种不同碳链长度的脂肪酸修饰HSA，结合流式细胞术、转录组测序、小动物活体成像等技术，揭示了棕榈酸修饰的16a-HSA NEs的级联靶向机制与免疫增效原理。

2.1. 棕榈酸修饰纳米乳剂的筛选优势

通过比较乙酸（2a）至油酸（Olea）等修饰的NEs，发现16a-HSA NEs（16O）能显著促进骨髓来源树突状细胞（BMDCs）摄取（较HSA NEs提升3.1倍）和成熟标志物CD40/CD80表达（p<0.01），并诱导最高水平的OVA特异性IgG2a（2.8倍于对照组）和细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）杀伤率（68.7%）。

2.2. 内质网靶向与自佐剂效应

超分辨显微成像显示16O在DC2.4细胞中与内质网标记物（ER-Tracker）共定位系数达0.82，而HSA NEs（0O）主要富集于溶酶体。转录组分析揭示16O上调CXCL3、IL36G等基因，通过C型凝集素受体和细胞色素P450代谢通路增强抗原呈递。

2.3. 淋巴结靶向递送验证

活体成像显示16O在注射后6小时于腘淋巴结蓄积量较0O高4.3倍（p<0.001），且优先被cDC1（CD8a⁺ DCs）摄取。Western blot证实16OA（含diABZI）组淋巴结中磷酸化TBK1水平提升5.2倍，IFN-β分泌量达1,243 pg/mL。

2.4. 系统性免疫应答激活

在预防性肿瘤模型中，16OA组89%小鼠经受4次EG7-OVA/B16-OVA攻击后无瘤生存。ELISPOT检测显示其脾淋巴细胞IFN-γ分泌斑点数（258 spots/10⁶ cells）显著高于游离抗原组（42 spots）。

2.5. 肿瘤微环境重塑

治疗性实验表明，16OA联合抗PD-1使62.5%的B16-OVA荷瘤小鼠肿瘤完全消退。肿瘤组织分析显示CD8⁺ T细胞浸润增加7倍，同时PD-1⁺ CD8⁺ T细胞比例上升至38.6%，印证了联合免疫检查点阻断的协同效应。

该研究首次阐明脂肪酸碳链长度与疫苗效力的构效关系，创建的级联靶向系统实现"淋巴结-DCs-内质网"三重精准递送，为肿瘤及感染性疾病疫苗研发提供了新范式。通过将内源性物质（HSA、棕榈酸）与合成佐剂（diABZI）有机结合，既解决了递送效率问题，又规避了外源材料毒性，具有显著的临床转化潜力。