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巴西芽孢杆菌SBB80抑制镰刀菌和新赤壳菌生长并防控甘蔗螟幼虫的研究
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年09月04日 来源:Biological Control 3.4
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本研究针对农业病虫害防控需求,从巴西有机蔬菜土壤中分离获得一株Bacillus velezensis SBB80,通过形态学、分子生物学及生化特性分析证实其能合成铁载体、脂肽类抗菌物质(surfactin和fengycin)及多种水解酶。实验显示该菌株对8种Fusarium和2种Neocosmospora菌株抑制率达51.01%-73.80%,对甘蔗螟(Diatraea saccharalis)幼虫7天致死率达77.08%,为开发兼具抗真菌和杀虫功能的生物制剂提供了优质菌种资源。
在农业生产中,真菌病害和虫害是威胁作物产量的两大难题。传统化学农药的过度使用不仅导致环境污染,还引发害虫抗药性和农药残留等问题。以微生物为基础的生物防治技术因其环境友好、靶向性强等优势成为研究热点。其中,芽孢杆菌(Bacillus)因其产孢能力强、抗菌物质丰富,被视为最具应用潜力的生防菌之一。Bacillus velezensis作为Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum的同物异名,近年来因其广谱抗菌活性备受关注,但其对鳞翅目害虫的防控效果及作用机制仍需深入探究。
来自巴西SoluBio农业技术公司的研究团队在《Biological Control》发表论文,报道了一株具有双重生物活性的Bacillus velezensis SBB80。该菌株从巴西利亚有机蔬菜土壤中分离获得,研究团队通过全基因组测序、MALDI-TOF质谱分析和多组生物测定等技术,系统评估了其对植物病原真菌和农业害虫的防控潜力。
材料与方法
研究首先从巴西有机蔬菜园采集土壤样品,通过稀释涂布法分离菌株。采用牛津纳米孔MinION测序仪完成全基因组测序,通过TYGS平台进行系统发育分析。通过CAS平板法检测铁载体,特定培养基评估酶活性。采用平板对峙法测定对10株植物病原真菌(8株Fusarium和2株Neocosmospora)的抑制率。通过饲喂法测试对6种鳞翅目害虫幼虫的毒力,包括甘蔗螟(Diatraea saccharalis)和草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)等重要农业害虫。
3.1 形态学特征
SBB80在TSA培养基上形成白色棉絮状菌落,HiCrome培养基中呈半透明不规则形态并伴随培养基变红。电镜观察显示其为杆状细胞(2.269±0.406 μm×0.823±0.091 μm),具有中央椭圆形芽孢。
3.2 分子特征
基因组系统发育分析确认其属于Bacillus amyloliquefaciens susp. plantarum分支(现归类为B. velezensis)。antiSMASH分析发现6个次级代谢产物合成基因簇,包括difficidin、bacilysin、fengycin等抗菌肽编码基因。
3.3 生化特性
该菌株能合成铁载体和28℃下产胞外多糖,分泌蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶、过氧化氢酶和磷酸酶等多种水解酶,但不具备溶磷固氮能力。
3.5 次级代谢产物
MALDI-TOF质谱检测到两组脂肽家族:m/z 1050-1100范围的surfactin类(如[M+Na]+ 1081.8)和m/z 1440-1550范围的fengycin类(如[M+H]+ 1449.9),与基因组预测结果一致。
3.6 抗真菌活性
对10株病原真菌的抑制率为51.01%-73.80%,其中对N. suttoniana抑制最强(73.80%),对F. hainanense抑制最弱(51.01%)。根据建立的效率分级标准,7株达到"+"级(50%-65%抑制),1株达"++"级(66%-85%)。
3.7 杀虫活性
对甘蔗螟幼虫表现出显著毒力,48小时死亡率达62.47%,7天达77.08%。但对其他5种夜蛾科害虫(如草地贪夜蛾)死亡率仅12.50%-35.41%,推测可能与夜蛾科特有的解毒机制有关。
讨论与意义
该研究首次报道了B. velezensis SBB80兼具抗真菌和特异性杀虫的双重功能。其作用机制可能涉及多途径协同:①铁载体竞争铁离子抑制真菌生长;②surfactin和fengycin破坏病原菌细胞膜;③水解酶降解昆虫体壁。值得注意的是,该菌株对甘蔗螟的特异性毒力为开发靶向生物农药提供了新思路,而其对不同夜蛾科害虫的效果差异,则揭示了害虫抗性机制的复杂性。
从应用角度看,该菌株的广谱抗真菌活性(特别是对Fusarium和Neocosmospora这两个包含多种毁灭性植物病原的属)和特异性杀虫能力的结合,使其有望成为"一菌多效"的生物防治制剂,减少田间施药次数。研究者建议后续应开展温室和大田试验,评估其在复杂环境下的稳定性和对非靶标生物的影响,为商业化应用提供数据支撑。这项研究为开发生物防治新产品提供了优质菌种资源和理论基础,对推动农业可持续发展具有重要意义。
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