Tenascin-C调控CXCR4+ B细胞迁移与法氏囊发育中皮质形成的机制研究

这篇研究揭示了Tenascin-C（TNC）作为关键细胞外基质（ECM）蛋白，通过调控CXCR4+ B细胞迁移和皮质区形成，影响鸟类法氏囊（BF）的发育。研究结合免疫组化、RNAscope和胚胎操作技术，证实TNC在胚胎期抑制B细胞前体归巢，而在成体皮质区与CXCL12协同调控B细胞迁出，为理解初级淋巴器官微环境构建提供了新视角。

　　

引言

法氏囊（Bursa of Fabricius, BF）是鸟类特有的初级淋巴器官，其独特的滤泡微环境（含髓质和皮质区）是B细胞发育的关键场所。尽管髓质区功能已被广泛研究，但皮质区的细胞组成与功能机制尚不明确。本研究通过多学科技术揭示了Tenascin-C（TNC）在皮质区形成和B细胞迁移中的核心作用。

材料与方法

采用白莱航鸡胚胎及成体组织，通过免疫荧光、RNAscope原位杂交、电镜和体外迁移实验等技术，结合RCAS病毒介导的Sonic hedgehog（Shh）过表达模型，系统分析了TNC的时空表达模式及其功能。

结果

CXCL12与desmin定义成体滤泡皮质区

成体BF皮质区由CXCL12⁺/desmin⁺/vimentin⁺间质网状细胞支撑，其分泌的ECM（含TNC）富集于皮质内层。B细胞呈现CXCR4^high（外层）与CXCR4^low/dim（近髓质区）的异质性分布，后者集中于TNC高表达区域。

皮质区ECM的分子特征

除TNC外，皮质区还表达I/III/IV型胶原、纤维连接蛋白（fibronectin）等，但TNC是唯一在皮质内层特异性富集的糖蛋白，形成从髓质边界向外的浓度梯度。

胚胎期TNC的时空限制

胚胎E11-E15期BF间质广泛表达fibronectin，但TNC仅在E18期出现于滤泡周围，与B细胞前体停止归巢的时间点吻合。RCAS-Shh病毒诱导TNC异位表达后，B细胞 colonization显著受阻，证实TNC-free环境对胚胎期归巢的必要性。

TNC抑制B细胞迁移的机制

体外实验显示，TNC涂层可阻断CXCL12诱导的CXCR4⁺ B细胞迁移（迁移距离：TNC组220.6 μm vs fibronectin组1098 μm）。而TNC吸附CXCL12后，B细胞通过CXCR4信号触发极化形态（长丝状伪足），AMD3100（CXCR4拮抗剂）可逆转此效应，提示TNC-CXCL12复合物通过整合素激活调控细胞黏附。

讨论

研究提出双重调控模型：胚胎期TNC缺失允许CXCR4^high B细胞前体归巢，而成体皮质区TNC与CXCL12协同形成“滞留区”，需CXCR4下调以启动B细胞迁出。这一机制与哺乳动物骨髓中CXCL12-abundant reticular（CAR）细胞的功能高度保守，揭示了ECM-趋化因子互作在淋巴细胞迁移中的普适性规律。

结论

TNC作为BF皮质区ECM的关键组分，通过动态调控CXCR4⁺ B细胞迁移，参与滤泡分区和B细胞输出，为理解免疫器官发育及淋巴细胞 trafficking提供了新范式。未来可探索TNC与整合素/S1P通路的交互作用，为免疫调控提供潜在靶点。