综述：通过质谱流式细胞术解析多发性骨髓瘤免疫表型多样性：呼吁统一门控策略

这篇综述系统探讨了多发性骨髓瘤（MM）免疫表型异质性难题，提出通过高维质谱流式细胞术（CyTOF）和下一代流式细胞术（NGF）建立标准化标记组合（如CD38dim/CD138bright）及门控策略，以解决当前诊断中缺乏统一标记面板的困境，并为个体化治疗和预后评估提供新思路。

　　

1 引言

多发性骨髓瘤（MM）以骨髓中异常浆细胞（PCs）增殖为特征，其发病机制涉及IgH易位、超二倍体变异等遗传异常。随着免疫调节药物（如来那度胺）和T细胞疗法（如CAR-T）的应用，肿瘤细胞表面抗原丢失（如CD38下调）和免疫微环境失调成为治疗失败的主因。当前免疫分型（IPT）技术面临核心挑战：缺乏能全面覆盖MM异质性的标准化标记组合，且流式细胞术（FCM）与CyTOF的检测差异亟待系统比较。

2 MM免疫图谱与临床意义

2.1 骨髓瘤免疫表型特征

正常浆细胞表达CD138、CD38和BCMA，而恶性浆细胞呈现CD38^dimCD138^bright、CD19^-/CD56⁺的异常模式。CD45低表达与疾病进展负相关，CD200和CD307则提示不良预后。值得注意的是，循环肿瘤细胞中CD56/CD138表达显著低于骨髓样本，而CD19缺失是区分恶性PCs的关键指标。

2.2 关键免疫亚群与门控策略

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  NK细胞：晚期MM患者NK细胞中DNAM-1和CD16表达降低，而CD69升高，提示功能耗竭。

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  γδ T细胞：Vδ2⁺亚群减少且TIM3⁺耗竭表型增多，与疾病进展显著相关。

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  B细胞：克隆性B淋巴细胞（CBLs）作为PCs前体，特征性缺失CD19/CD20但保留CD34表达。

3 高维流式技术实践方案

3.1 技术对比

CyTOF凭借金属标签技术可同时检测43个标记，远超传统流式（8-12个标记），且无需荧光补偿。但样本制备要求严苛：新鲜样本需经Benzonase处理避免聚集，冻存样本需优化复苏流程以维持CD45等表位完整性。

3.2 数据分析挑战

推荐采用PeacoQC算法清除信号噪声，结合t-SNE和FlowSOM聚类分析。典型案例显示，CD3⁺浆细胞亚群可能干扰T细胞分析，需通过CD138/CD38双阳门控排除。

4 挑战与未来方向

4.1 技术瓶颈

达雷妥尤单抗治疗会导致CD38表达缺失，需引入替代标记（如BCMA）。CyTOF数据量庞大，需开发适配40参数以上的机器学习算法（如Opt-SNE）解析免疫图谱。

4.2 临床转化

40标记光谱流式可识别高危冒烟型骨髓瘤（SMM），其CD49d^-/CD56^-表型提示外周血播散风险。未来需建立跨中心标准化panel，整合scRNA-seq验证表面组学发现。

5 结论

统一的高维免疫表型分析将革新MM诊疗范式，从靶向治疗选择（如抗CD138联合硼替佐米）到MRD监测，最终改善患者生存。