靶向DHHC9介导的STRN4棕榈酰化抑制YAP驱动癌症转移的创新治疗策略

这篇研究揭示了DHHC9通过棕榈酰化修饰STRIPAK复合体核心组分STRN4（C701位点），激活Hippo通路效应分子YAP/TAZ，促进腺癌细胞迁移和转移的分子机制。研究者结合蛋白质组学筛选出DHHC9特异性底物，并通过虚拟筛选发现临床药物Treprostinil和10-HCPT能有效抑制DHHC9活性，为靶向"不可成药"的Hippo通路提供了新策略。

　　

3.1 DHHC9在腺癌中的关键调控作用

通过TCGA数据库分析发现，DHHC9在结直肠癌、肺腺癌等腺癌组织中显著高表达，且与患者不良预后密切相关。多组学聚类分析将肿瘤分为5个亚群，其中D亚群以腺癌为主且DHHC9表达特异性富集，提示其作为腺癌特异性治疗靶点的潜力。

3.2 棕榈酰化依赖的迁移促进作用

基因敲除实验显示DHHC9缺失显著抑制HCT116和A549细胞迁移，但不影响增殖。关键实验证明：①DHHC9催化活性位点C169S突变体丧失促迁移功能；②棕榈酸剥夺（DFBS培养）或广谱抑制剂2-BP处理可阻断DHHC9作用，证实其棕榈酰转移酶活性是功能基础。

3.3 体内模型的验证

采用脾-肝自发转移模型和盲肠原位移植模型，发现shDHHC9组小鼠肝脏转移灶减少60%（p<0.01），且病理切片显示转移面积显著缩小。值得注意的是，DHHC9抑制仅影响转移过程，对原发瘤生长无显著影响。

3.4 蛋白质组学揭示STRN4底物

改良酰基-生物素交换（ABE）技术结合质谱分析，在HCT116和A549细胞中鉴定出14个共同底物。STRING互作网络突出显示STRN4（STRIPAK复合体支架蛋白）与Hippo激酶STK3的密切关联。验证实验证实：①DHHC9与STRN4存在直接相互作用；②STRN4-C701S突变体丧失棕榈酰化修饰能力；③该位点在物种间高度保守。

3.5 Hippo-YAP通路的调控机制

RNA-seq与GSEA分析显示DHHC9缺失导致YAP/TAZ-TEAD靶基因集显著抑制（NES=-1.7858）。分子机制上：①棕榈酰化STRN4招募PP2A使YAP-S128去磷酸化；②促进YAP核转位并激活CCN1/ANKRD1等靶基因；③TEAD抑制剂MGH-CP1可逆转DHHC9过表达引起的迁移增强。

3.6 小分子抑制剂的发现

基于DHHC9晶体结构（PDB 8HF3）进行虚拟筛选，从35,143个化合物中锁定Treprostinil（结合自由能-60.75 kcal/mol）和10-HCPT。功能验证显示：①10 μM浓度即可抑制STRN4棕榈酰化；②热位移实验证实二者直接结合DHHC9；③在过表达模型中能特异性阻断DHHC9-STRN4轴的促迁移作用。

3.7 体内治疗效果评估

动物实验采用临床等效剂量（Treprostinil 100 μg/kg，10-HCPT 2 mg/kg），治疗组肝脏转移结节减少50%以上（p<0.01），且无显著毒性反应。值得注意的是，两种药物对脾脏原发瘤重量无影响，印证其特异性抗转移特性。

讨论与展望

该研究创新性地将棕榈酰化修饰与磷酸酶调控网络相联系，揭示了DHHC9-STRN4-YAP轴在腺癌转移中的核心地位。临床级化合物Treprostinil的再定位为转化医学提供捷径，但需注意10-HCPT的拓扑异构酶抑制副作用。未来研究可探索：①STRN4棕榈酰化对STRIPAK复合体组装的影响；②DHHC9与其他免疫检查点分子（如PD-L1）的协同调控；③开发新一代选择性DHHC9变构抑制剂。