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基于LC-MS/MS的trans-4,5-环氧-(E)-2-癸烯醛痕量检测方法优化:推动人体挥发性有机化合物生物标志物研究
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年09月05日 来源:Microchemical Journal 5.1
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本文开发了一种优化的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法,通过2,4-二硝基苯肼(DNPH)衍生化和HLB固相萃取(SPE)技术,实现了血液中痕量trans-4,5-环氧-(E)-2-癸烯醛的高灵敏度检测(LOD 0.3 ng/mL,R2=0.9984)。该研究克服了传统GC-O-MS法的主观性和低通量局限,为脂质过氧化相关疾病(如心血管疾病、神经退行性疾病)的生物标志物研究提供了可靠分析工具。
Highlight
本研究通过三项创新突破解决了trans-4,5-环氧-(E)-2-癸烯醛的分析难题:(i)采用DNPH衍生化稳定醛基;(ii)HLB-SPE柱纯化技术;(iii)系统优化色谱与质谱条件。这些改进使该LC-MS/MS方法在1-300 ng/mL范围内呈现优异线性(R2=0.9984),加标血样相对标准偏差(RSD)为12.53%。
Optimization of the LC-MS/MS analytical method
研究发现LC-MS/MS技术无法直接分析trans-4,5-环氧-(E)-2-癸烯醛,但经DNPH衍生后,该醛类化合物能与DNPH形成稳定腙(反应原理见图S1),从而获得理想色谱保留行为。通过对比乙腈-超纯水与乙腈-乙酸铵缓冲液体系,最终确定前者为最优流动相组合。
Conclusions
作为脂质过氧化产物,trans-4,5-环氧-(E)-2-癸烯醛因其挥发性和低浓度成为血液分析难点。本研究建立的LC-MS/MS平台不仅克服现有技术局限,更通过方法学创新为探索该化合物在心血管疾病、阿尔茨海默病等氧化应激相关疾病中的标志物作用提供了标准化研究工具。
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