新型碱基编辑器ACGBEmax实现嘌呤嘧啶同步替换，推动体外体内高效诱变筛选

来自He等的研究团队开发了创新型碱基编辑器ACGBEmax，通过整合工程化DNA脱氨酶与糖基化酶，首次实现A/C/G碱基的同步替换。该工具能在培养细胞和小鼠肝脏中高效产生多样化突变体，成功应用于HPRT基因6-硫鸟嘌呤抗性筛选和Ctnnb1致癌突变鉴定，为高通量基因型-表型研究提供了革命性技术平台。

　　

遗传突变作为人类疾病、作物性状和蛋白质功能的核心驱动力，其与表型的关联机制仍待深入解析。传统碱基编辑器因突变类型单一，严重限制了饱和诱变和功能筛选的深度。研究团队突破性开发了ACGBEmax编辑器——通过融合双功能脱氨酶、工程化N-甲基嘌呤DNA糖基化酶(MPG)及进化版SOS响应相关肽酶结构域与nCas9(D10A)，实现了哺乳动物细胞中A/T/C/G碱基的精准转换。

这项技术的亮点在于：

• 同步完成嘌呤(A/G)和嘧啶(C)的替换

• 在蛋白质编码位点产生多样化变异

• 支持体外培养细胞和小鼠肝脏的原位诱变

实验验证中，ACGBEmax成功筛选出HPRT基因介导的6-硫鸟嘌呤(6-TG)抗性突变，并在小鼠肝脏中鉴定出Ctnnb1已知及潜在致癌突变。该工具拓展了碱基编辑工具箱的多样性，为蛋白质定向进化、功能基因组学研究以及癌症驱动突变发现提供了高效技术支撑。图形化摘要生动展示了ACGBEmax如何通过协同作用机制，在靶位点产生丰富的突变谱系。