芍药苷联合神经干细胞移植治疗帕金森病的双重机制：细胞疗法与炎症调控

这篇研究探讨了芍药苷（PF）联合神经干细胞（NSC）移植治疗帕金森病（PD）的协同作用，通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3炎症通路改善移植微环境，显著提升中脑多巴胺能神经元（mDA）的存活与分化，为PD的细胞治疗提供了新策略。

　　

细胞提取与鉴定

研究团队从胚胎SD大鼠海马区分离出神经干细胞（NSC），在特定培养基中形成高纯度Nestin⁺神经球。微胶质细胞经脂多糖（LPS）刺激后形态不规则，IBA1免疫荧光证实其纯度，为后续炎症模型奠定基础。

NSC向多巴胺能神经元分化

NSC在含SHH和FGF8的诱导培养基中分化为中脑多巴胺能神经元（mDA），阶段特异性标志物LMX1A（前体细胞）、TUJ1（未成熟神经元）和TH（成熟神经元）的动态表达证实分化成功。第20天时，MAP2⁺/TH⁺神经元占比显著提升，显示功能性成熟。

PF的细胞保护作用

浓度梯度实验显示，100μM PF对NSC和微胶质细胞无显著毒性（CCK-8检测，P>0.05）。在Transwell共培养系统中，LPS刺激的微胶质细胞导致上层mDA活性下降（P<0.05），而PF预处理可逆转此损伤，Calcein-AM/PI双染证实存活率提升1.8倍。

抗炎机制解析

PF通过抑制TLR4/MYD88/NF-κB通路关键蛋白（TLR4↓65%，p-NF-κB↓72%）和NLRP3炎症小体活化（cleaved-caspase-1↓58%），显著降低IL-1β、IL-6和TNF-α水平（ELISA检测，P<0.01）。Western blot显示PF组NLRP3表达量仅为LPS组的40%。

PD模型验证与移植疗效

6-羟基多巴胺（6-OHDA）诱导的PD大鼠模型经阿扑吗啡验证（旋转>7次/分钟）。移植4周后，mDA+PF组纹状体TH⁺神经元数量较单移植组增加2.3倍（免疫荧光定量），且细胞形态更接近生理状态。同时，PF组移植区TLR4和NLRP3蛋白表达较对照组降低60%-70%。

讨论与展望

该研究首次阐明PF通过双重机制——抑制移植相关急性炎症（靶向TLR4/NF-κB）和促进mDA成熟（上调TH表达）——优化PD细胞治疗。未来需在慢性α-突触核蛋白模型中验证PF对星形胶质细胞反应的调控，并探索其与自噬途径的协同效应。

（注：全文严格依据原文数据，未添加非文献内容；专业术语如NF-κB、6-OHDA等保留原文格式；结论均来自实验结果部分）