甜菊叶提取物（绿原酸及其类似物）作为新型安全饲料添加剂的综合毒理学评价：急性毒性、亚慢性毒性、遗传毒性与致畸性研究

本研究系统评估了富含绿原酸（CGA, 43.3%）的甜菊叶提取物（SREC）作为饲料添加剂的安全性。通过急性经口毒性（LD50 >5,000 mg/kg）、90天亚慢性毒性（50,000 mg/kg饲料无异常）、Ames试验（TA97/TA102菌株阴性）、小鼠骨髓微核试验及大鼠致畸试验等全套毒理学研究，证实SREC无急性/亚慢性毒性、遗传毒性及致畸性，为替代抗生素生长促进剂提供了重要安全依据。

　　

引言

随着畜牧业对抗生素生长促进剂（AGPs）的限制，植物源性饲料添加剂需求激增。甜菊叶提取物（SREC）以43.3%绿原酸（CGA）为核心成分，具有抗氧化、抗炎等多重生物活性，但其系统性毒理学数据尚属空白。本研究首次通过多维度实验体系，全面评估SREC作为饲料添加剂的安全性。

材料与方法

受试物与动物模型

SREC由诸城昊天制药提供，SPF级SD大鼠（180-220 g）和ICR小鼠（18-22 g）购自北京SBF生物技术公司。所有实验均获中国农业大学动物伦理委员会批准（AW80804202-2-1）。

实验设计

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  急性毒性：按OECD 425指南，单次灌胃5,000 mg/kg·bw SREC，观察14天

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  亚慢性毒性：4组大鼠分别饲喂含0/2,000/10,000/50,000 mg/kg SREC饲料90天

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  遗传毒性：Ames试验（±S9代谢活化）、骨髓微核试验（1,250-5,000 mg/kg·bw）、精子畸形试验

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  致畸性：孕鼠妊娠第7-16天灌胃312.5-5,000 mg/kg·bw，第20天剖检

结果

急性与亚慢性安全性

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  5,000 mg/kg·bw单次给药无死亡或病理损伤

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  90天喂养中，50,000 mg/kg组雌鼠ALT轻度升高（p<0.05），但属生理波动范围；脏器系数与组织病理学无异常

遗传毒性三重验证

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  Ames试验：30 μg/plate剂量下TA₉₇-TA₁₀₂菌株回复突变数均未超阴性对照2倍

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  骨髓微核率：5,000 mg/kg组PCE微核率（1.2‰）与阴性对照（1.0‰）无差异（p>0.05）

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  精子畸形率：各剂量组（1.8-2.1%）与阴性对照（1.9%）相当

生殖发育安全性

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  孕鼠5,000 mg/kg组净增重（68.3 g）与对照组（70.1 g）无差异

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  胎鼠骨骼染色显示，各剂量组胸骨骨化延迟发生率（12-15%）与对照组（13%）相当

讨论

SREC的安全性优势体现在：

1. 1.

   宽安全窗：急性毒性LD₅₀超过5,000 mg/kg，显著优于多数植物提取物（如黄酮类）

2. 2.

   代谢惰性：Ames试验中±S9代谢系统均未诱发突变，提示无前毒物转化风险

3. 3.

   跨代安全：5,000 mg/kg·bw未影响胚胎器官形成，优于某些金属螯合添加剂

与同类研究对比，SREC的NOAEL（未观察到有害作用剂量）高达50,000 mg/kg饲料，较槟榔提取物（4,500 mg/kg）和草药金属制剂（600 mg/kg）更具应用潜力。

结论

本研究确立SREC作为饲料添加剂在急性、亚慢性、遗传和发育毒性层面的安全性阈值，为其替代抗生素提供了毒理学基础。未来需开展多物种长期饲喂试验及CGA代谢机制研究，以进一步拓展其在无抗养殖中的应用前景。