综述：鲍曼不动杆菌作为革兰阴性菌外膜囊泡研究与应用模型的系统综述

这篇综述系统梳理了鲍曼不动杆菌(AbOMVs)外膜囊泡(OMVs)的生物发生机制、蛋白组成、调控因素及其在致病性和生物技术应用中的多重作用，特别聚焦于OMVs在抗生素耐药基因转移、疫苗开发中的潜力，为抗多重耐药菌(MDR)感染提供了新思路。

　　

1 鲍曼不动杆菌作为OMVs研究模型

鲍曼不动杆菌作为非发酵革兰阴性机会致病菌，因其卓越的环境适应力和多重耐药性(MDR)成为医院感染的主要威胁。该菌释放的20-500纳米外膜囊泡(OMVs)具有与细菌外膜相似的双层磷脂结构，最早于1979年被发现能封装疏水分子。随着2009年首个临床株AbOMVs蛋白组的解析，其作为研究模型的价值凸显——兼具临床相关性和实验可操作性，拥有成熟的遗传操作工具和小动物感染模型。

2 AbOMV生物发生机制

目前提出四种生物发生模型：

1）外膜-肽聚糖解离模型：OmpA等蛋白与肽聚糖(PG)的相互作用减弱导致膜凸起。bfmS双组分系统通过调控ompA表达影响囊泡产量；

2）肽聚糖重构模型：锌调控肽酶ZrlA突变导致PG片段积累，增加膜通透性；

3）错误蛋白累积模型：如丝氨酸蛋白酶Ctp缺失造成周质空间蛋白堆积；

4）膜脂重塑模型：棕榈酸等长链不饱和脂肪酸改变膜流动性。值得注意的是，温度、渗透压等环境压力可协同调控这一过程。

3 调控AbOMV产生的关键因素

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  抗生素刺激：头孢他啶通过抑制PG合成使产量提升2.2倍，亚胺培南诱导碳青霉烯酶OXA-58的囊泡分泌

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  基因变异：hfq缺失导致OmpA含量降低，ctp突变使囊泡直径增大26.9%

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  培养条件：稳定期囊泡产量达对数期10倍，营养匮乏时直径缩小至30纳米

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  纯化方法：蔗糖密度梯度法获取囊泡数量最多（10¹⁰ CFU/mL），而天然提取法获得囊泡更大（平均269.9纳米）

4 AbOMV蛋白组特征

通过LC-MS/MS鉴定的蛋白中，73%源自外膜或未知定位，27%为胞质蛋白。关键组分包括：

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  毒力因子：OmpA（所有研究均检出）、磷脂酶C(PLC)、血凝素样蛋白(FHA)

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  耐药蛋白：10种β-内酰胺酶（含OXA-24、NDM-1）、RND外排泵

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  应激相关蛋白：超氧化物歧化酶(SOD)、伴侣蛋白GroEL

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  特殊成分：噬菌体主要衣壳蛋白、RTX毒素相关钙结合蛋白

5 AbOMV的致病网络

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  免疫逃逸：通过OmpA诱导线粒体碎片化，激活活性氧(ROS)导致细胞凋亡

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  生物膜形成：EpsA等蛋白促进细菌聚集，增强抗生素耐受

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  基因水平转移：携带bla_OXA-24质粒的OMVs使敏感株获得碳青霉烯耐药性（转化效率10^-5–10^-8）

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  铁摄取系统：细菌铁蛋白通过囊泡浓缩环境中的铁元素

6 OMV疫苗开发突破

两种技术路线展现前景：

1）天然OMVs疫苗：ΔlpxD突变株生产的无LOS囊泡，经10倍剂量补偿后可实现85%小鼠保护率；

2）工程化OMVs：

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  表达PagL去酰基酶降低内毒素毒性

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  金纳米颗粒-OMVs复合物使兔IgG滴度提升8倍

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  异源表达Omp22的E.coli OMVs对败血症模型保护率达92%

最新动物实验显示，肌肉注射在全身感染模型中保护效果最优，而鼻内接种对呼吸道定植清除更有效。被动免疫联合喹诺酮类药物可显著降低肺组织菌载量（3-log下降）。

7 展望

AbOMVs研究揭示了细菌纳米级通讯系统的精密调控，其多重生物学功能为应对MDR感染提供了全新视角。未来研究需建立标准化囊泡分离鉴定流程，并探索基于OMVs的联合治疗策略，这对开发下一代"智能"抗菌制剂具有重要指导意义。