综述：细胞外囊泡的生物发生机制及其对肿瘤免疫微环境的影响

这篇综述深入探讨了细胞外囊泡（EVs）的异质性生物发生机制及其在肿瘤免疫微环境（TIME）中的双重调控作用。文章系统梳理了外泌体（exosomes）、微泡（microvesicles）等典型EVs及迁移体（migrasomes）等非典型EVs的形成途径，重点解析了ESCRT复合物、四跨膜蛋白（tetraspanins）等关键分子在EVs生成和PD-L1等免疫检查点分子分选中的作用。作者还总结了肿瘤源性EVs（TEVs）通过递送miRNA、circRNA等核酸或PD-L1/TGF-β等蛋白重塑TIME的机制，并展望了EVs作为液体活检标志物和药物载体的临床应用挑战。

　　

细胞外囊泡的生物发生机制

细胞外囊泡（EVs）是由几乎所有细胞类型释放的纳米级膜泡，根据起源和大小可分为外泌体（50-150 nm）、微泡（100-1000 nm）和凋亡小体（>1000 nm）等。外泌体通过多泡体（MVBs）与质膜融合释放，其形成依赖ESCRT复合物（Endosomal Sorting Complex Required for Transport）或非经典途径如神经酰胺（ceramide）诱导的膜弯曲。其中，ESCRT-0通过泛素化识别货物（如PD-L1），而ESCRT-III驱动膜剪切。有趣的是，ALIX蛋白与syndecan-syntenin形成的三元复合物可替代ESCRT-0功能，促进特定外泌体亚群分泌。

微泡则通过质膜出芽产生，涉及Rho/ROCK信号和I-BAR结构域蛋白（如MIM）介导的膜变形。近期发现的迁移体（migrasomes）则源自细胞迁移时收缩纤维末端的膜膨大，其形成需Tspan4富集的膜微域和Rab35-PI(4,5)P₂轴调控。这些EVs亚群的生物发生机制差异决定了其携带的核酸（如miR-21-5p）、蛋白（如CD63）和代谢物（如腺苷）组成。

EVs在肿瘤免疫微环境中的调控网络

肿瘤源性EVs（TEVs）通过递送免疫调节分子重塑TIME。例如：

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  T细胞耗竭：黑色素瘤外泌体中的PD-L1结合CD8⁺T细胞的PD-1，抑制其细胞毒性；结直肠癌EVs携带的circCCAR1则稳定PD-1 mRNA，导致免疫治疗耐药。

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  巨噬细胞极化：卵巢癌EVs的circATP2B4通过激活SREBF1/PI3K-AKT通路促进M2型极化；而胶质母细胞瘤EVs的miR-25则抑制cGAS-STING信号，削弱M1型抗肿瘤活性。

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  NK细胞抑制：肝癌EVs递送miR-17-5p下调NKG2D受体，而急性髓系白血病EVs的PD-L1直接抑制NK细胞活化。

双向通讯：免疫细胞EVs的反向调控

免疫细胞衍生的EVs同样影响肿瘤进展。CD8⁺T细胞EVs通过FasL诱导肿瘤基质细胞凋亡，而M1巨噬细胞EVs的miR-150可抑制胶质瘤MMP16表达。相反，MDSC EVs的TGF-β1促进Treg扩增，形成免疫抑制性微环境。

临床应用与挑战

EVs作为液体活检标志物已用于前列腺癌（ExoDx?检测）和肺癌（Guardant360?）诊断。在治疗方面，装载KRAS^G12D siRNA的间充质干细胞EVs（NCT03608631）和DC衍生的抗原呈递EVs（NCT01159288）已进入临床试验。然而，EV异质性和规模化生产仍是转化医学的主要瓶颈。

未来研究需进一步解析EV生物发生与货物分选的精确调控，并开发靶向特定EV亚群的策略，以突破当前肿瘤免疫治疗的局限性。