无序Ferlin蛋白C2A-C2B连接区：膜结合热点与线性基序的信号转导枢纽

【编辑推荐】本研究首次揭示Ferlin家族蛋白中C2A-C2B连接区（IDR）的双重功能：不仅作为膜结合"热点"（如耳铁蛋白的富精氨酸区域与AP2结合双亮氨酸基序），更通过短线性基序（SLiM）招募SH3/WW结构域蛋白形成信号复合物。该发现为理解囊泡运输蛋白的膜定位与信号转导机制提供了新视角。

　　

Highlight

蛋白质生产与纯化

以pcDNA3.1耳铁蛋白质粒（法国巴斯德研究所馈赠）和pcDNA4/TO/GFP-肌营养不良蛋白-myc-his（英国纽卡斯尔大学馈赠）为模板，分别扩增小家鼠耳铁蛋白（GenBank: AY586513.1）和人类肌营养不良蛋白（GenBank: AF075575.1）。将C2A-C2B连接区克隆至pET28a(+)载体（Novagen）的BamHI和HindIII限制性酶切位点之间，并在连接区与His标签之间插入TEV酶切位点...

Ferlin C2A-C2B连接区编码潜在膜结合与SLiM序列

通过IUPred3分析耳铁蛋白、肌营养不良蛋白等家族成员的氨基酸序列（图1），发现耳铁蛋白存在两个主要无序区域：可变剪接的C2A-C2B连接区和C2D-C2F间序列。值得注意的是，肌营养不良蛋白连接区含有耳铁蛋白中未检测到的SH3/WW结构域结合基序，这暗示不同Ferlin成员可能通过连接区差异招募特定信号分子。

讨论

Ferlin作为含有多重Ca²⁺敏感结构域的膜运输蛋白，其C2A-C2B连接区虽为内在无序区域（IDR），却展现出显著的序列多样性与功能特异性。我们发现耳铁蛋白连接区以32μM中等解离常数结合膜结构，且其膜结合能力受可变剪接调控——这种现象可能解释不同剪接变体在突触小泡循环中的功能差异。特别有趣的是，肌营养不良蛋白连接区通过"分子钓鱼"机制（fly-casting）特异性招募含SH3/WW结构域的适配体蛋白，这种选择性相互作用为理解Ferlin家族成员的组织特异性功能提供了新线索。