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牛源十二指肠贾第虫(Giardia duodenalis) Assemblage E感染蒙古沙鼠模型的建立及其生活周期研究
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年09月06日 来源:Parasitology International 1.9
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本研究针对十二指肠贾第虫(Giardia duodenalis)Assemblage E缺乏可靠动物模型的问题,通过牛粪来源包囊感染蒙古沙鼠,成功构建了经济稳定的感染模型。研究采用33%硫酸锌浮选法纯化包囊,经gdh基因测序确认虫株类型,通过低剂量(5×104)和高剂量(1×105)感染实验,结合组织病理学与扫描电镜(SEM)技术,首次完整再现了Assemblage E的十二指肠趋向性定植、胆酸介导的包囊形成过程,为贾第虫病宿主特异性机制研究提供了关键工具。
贾第虫病作为一种全球性人兽共患寄生虫病,其病原体十二指肠贾第虫(Giardia duodenalis)存在多个基因型(Assemblage),其中感染反刍动物的Assemblage E因体外培养困难,其致病机制研究长期受限。现有研究多集中于感染人类的Assemblage A/B,而Assemblage E的宿主互作、生活周期等关键科学问题缺乏合适的动物模型支撑,严重制约了防控策略开发。
为解决这一瓶颈问题,Yifei Li等研究者创新性地选择蒙古沙鼠作为实验宿主,从牛粪便中分离纯化Assemblage E包囊(经33%硫酸锌浮选和gdh基因测序验证),通过精确剂量(5×104和1×105包囊)的口服感染,结合多维度检测技术,在《Parasitology International》发表了突破性研究成果。
关键技术方法包括:1)牛源包囊的硫酸锌梯度纯化与基因型鉴定;2)五日龄蒙古沙鼠的分组感染实验(PBS对照/低/高剂量组);3)感染后第8天的系统解剖与组织采样;4)苏木精-伊红(H&E)染色观察十二指肠病理变化;5)扫描电镜(SEM)三维重构虫体空间分布与形态转化过程。
生长表型与病理特征
感染组沙鼠出现显著生长迟滞和软便症状,高剂量组十二指肠绒毛萎缩严重,SEM显示滋养体(trophozoite)密度呈梯度分布:十二指肠>空肠>回肠,首次证实Assemblage E的十二指肠趋向性(duodenal tropism)。
包囊形成动态
在回肠部位观察到胆酸(bile acid)介导的形态转化:滋养体逐渐变圆、腹吸盘(ventral disc)退化并形成包囊壁(cyst wall),完整再现了体内包囊发生(encystation)过程。
该研究不仅填补了Assemblage E生活周期研究的空白,其建立的蒙古沙鼠模型更具三大优势:1)经济性(较大型反刍动物成本降低90%以上);2)可重复性(感染成功率100%);3)临床相关性(完美模拟自然感染病理特征)。这一模型为后续研究宿主特异性分子机制、筛选抗贾第虫药物提供了不可替代的实验平台,对制定人兽共患传播阻断策略具有重要指导价值。
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