全反式维甲酸通过TNF信号通路加剧Stevens-Johnson综合征及中毒性表皮坏死松解症的机制研究：网络毒理学、分子对接与实验验证

本研究通过整合网络毒理学、分子对接及实验验证，揭示全反式维甲酸（ATRA）通过激活TNF-α/NF-κB信号通路（含MAPK、JAK-STAT等）加剧Stevens-Johnson综合征（SJS）和中毒性表皮坏死松解症（TEN）的分子机制。实验证实ATRA可诱导角质形成细胞（HaCaT/NHEK）凋亡（cleaved caspase-3↑）、促炎因子（TNF-α/IL-6/PTGS2）释放及NF-κB磷酸化，为临床药物安全性评估提供新靶点。

　　

Highlight

本研究创新性整合多学科方法，首次阐明全反式维甲酸（ATRA）通过"死亡受体-细胞因子风暴"级联反应恶化SJS/TEN的机制。

Prediction of ATRA targets

通过SwissTargetPrediction等9大平台预测ATRA靶点，其三维结构像"分子钥匙"精准匹配159个SJS相关靶点（如TNF、IL6），其中27个为SJS/TEN共同靶标。

Key pathway research

蛋白互作网络（PPI）显示TNF、MAPK1等31个核心靶点构成"炎症-凋亡调控网"，通路富集发现TNF信号像"中枢开关"激活MAPK/JAK-STAT通路（P<0.05）。

Molecular docking validation

分子对接显示ATRA与TNF结合能达-9.8 kcal/mol，其羧基与Tyr⁵⁹形成氢键，像"锁钥嵌合"般稳定。

Experimental verification

细胞实验证实：

1. 1.

   ATRA使HaCaT细胞存活率暴跌40%（CCK-8法），LDH释放量翻倍；

2. 2.

   荧光显微镜下可见细胞"凋亡小体"增多（Annexin V+细胞占35%）；

3. 3.

   Western blot显示NF-κB p65磷酸化水平激增3倍，COX-2蛋白表达量飙升。

Conclusion

ATRA如同"双刃剑"，通过TNF-α/NF-κB轴触发"细胞焦亡-炎症风暴"恶性循环，为临床预警ATRA致SJS/TEN风险提供理论依据。