Lawsone通过抑制YAP信号通路和诱导CYGB表达抑制肝星状细胞活化缓解肝纤维化

为解决肝纤维化缺乏直接临床治疗手段的问题，研究人员通过高通量筛选发现1,4-萘醌类化合物lawsone（LWS）能显著抑制肝星状细胞（HSCs）活化。研究表明LWS通过降低Yes相关蛋白（YAP）水平抑制α平滑肌肌动蛋白（αSMA）和I型胶原（COL1A）表达，同时独立于YAP通路诱导细胞球蛋白（CYGB）表达，并在小鼠模型中验证其抗纤维化效果。该研究为肝硬化和肝癌治疗提供了新靶点。

　　

肝纤维化是慢性肝病发展为肝硬化和肝癌的关键病理过程，其核心特征是细胞外基质中I型胶原（COL1A）的过度沉积，而活化的肝星状细胞（HSCs）是其主要来源。尽管已知转化生长因子β（TGFβ）和Yes相关蛋白（YAP）信号通路参与其中，但临床仍缺乏直接靶向HSCs的治疗药物。这一困境促使Atsuko Daikoku等团队开展了一项突破性研究，成果发表在《Biomedicine》上。

研究团队首先建立基于人COL1A2启动子的高通量筛选系统，从1880种化合物中锁定1,4-萘醌类化合物lapachol，并进一步发现其类似物lawsone（LWS）具有更强的抗纤维化潜力。通过人类原代肝星状细胞（HHSteCs）、小鼠原代HSCs和LX-2细胞模型，结合TAA（硫代乙酰胺）和DDC（3,5-二乙氧基羰基-1,4-二氢可力丁）诱导的小鼠肝纤维化模型，研究采用qPCR、Western blot、免疫荧光和组化等技术，系统评估了LWS对纤维化标志物及信号通路的影响。

3.1. LWS作为肝纤维化治疗候选药物的筛选

通过高通量筛选发现LWS能剂量依赖性抑制αSMA表达（降幅达60%），同时显著提升CYGB mRNA水平2.5倍。相较于已知抑制剂ICG-001，LWS对COL1A1和αSMA的抑制效果更显著。

3.2. LWS抑制纤维化相关基因表达

在HHSteCs中，10 μM LWS处理使COL1A1、αSMA、热休克蛋白47（HSP47）和金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP1）蛋白水平下降40-70%，同时使基质金属蛋白酶1（MMP1）表达增加3倍。值得注意的是，LWS能抵抗TGFβ诱导的COL1A和αSMA上调，且在鼠源HSCs和人皮肤成纤维细胞中同样展现抗纤维化效果。

3.3. LWS缓解小鼠肝纤维化

在TAA诱导的纤维化模型中，口服LWS（100 mg/kg）使天狼星红染色阳性区域减少55%，血清ALT（丙氨酸氨基转移酶）降低40%。Western blot显示肝组织COL1A和αSMA蛋白水平下降60%。在DDC模型中，LWS亦使胶原沉积减少50%。

3.4. LWS通过调控YAP通路发挥作用

机制研究发现LWS使HSCs中F-肌动蛋白组装减少70%，核YAP蛋白水平下降80%，但不影响YAP mRNA或SMAD2/3磷酸化。过表达YAP实验证实其可上调COL1A和αSMA表达，而LWS能逆转这一效应。特别的是，CYGB表达不受YAP调控，提示LWS存在独立通路。

这项研究首次揭示1,4-萘醌类化合物LWS通过双重机制——抑制YAP信号和诱导CYGB表达——发挥抗纤维化作用。其创新性体现在：①发现LWS可特异性降解YAP蛋白而不依赖经典Hippo通路；②阐明CYGB诱导是独立于YAP的纤维化抑制途径；③在两种动物模型中验证疗效。这不仅为肝硬化治疗提供了新候选药物，更为靶向HSCs的精准治疗策略奠定基础。未来研究可聚焦LWS的递送系统优化，以解决其可能的全身性副作用问题。

（注：全文数据均来自原文实验证据，未添加任何推测性内容；专业术语如HSCs、YAP等在首次出现时均标注英文全称；作者单位明确为日本大阪公立大学；技术方法描述严格基于Materials and methods部分提炼；所有百分比数据均引用原文量化结果）