综述：表达鸡毒支原体TM1蛋白的重组酿酒酵母口服免疫可诱导特异性抗体产生和免疫保护作用

这篇综述创新性地利用重组酿酒酵母(S. cerevisiae)表面展示系统开发口服鸡毒支原体(MG)疫苗，通过生物信息学筛选TM1膜蛋白作为免疫原，证实EBY100/pYD1-TM1能刺激鸡体产生IgG和sIgA抗体，有效预防MG在呼吸系统的定植，为禽类慢性呼吸道疾病(CRD)防控提供了安全高效的新策略。

　　

免疫原性预测与TM1蛋白分析

生物信息学分析显示，MG R_low株的TM1蛋白（Uniprot Q7NBE2）具有3个N-糖基化位点（90/194/239）和32个磷酸化位点。TMHMM-2.0预测其含有4个跨膜结构域，ABCpred和BepiPred工具共同鉴定出6个线性B细胞表位，其中²⁵¹KQKEKQK²⁵⁷区域抗原性最强。SOPMA软件显示该蛋白含43.21%α-螺旋，符合膜蛋白典型特征。

重组酵母构建与免疫评估

采用α-凝集素表面展示系统构建EBY100/pYD1-TM1工程菌，Western blot验证TM1蛋白成功表达。口服免疫试验显示，实验组血清IgG水平较对照组提高3.2倍（P<0.01），气管洗液sIgA含量增加2.8倍。病理学观察发现，免疫组鸡只气囊损伤评分降低76%，肺组织MG载量下降至10³ CFU/g，显著低于攻毒对照组的10⁷ CFU/g。

作用机制探讨

酵母细胞壁成分β-1,3-D-葡聚糖(BGs)通过激活TLR2/NF-κB通路增强抗原提呈。TM1蛋白诱导的抗体可阻断MG黏附素vlhA与宿主细胞结合，电镜观察显示免疫组气管纤毛脱落减少83%。值得注意的是，该疫苗可缓解MG继发大肠杆菌感染导致的免疫抑制，使新城疫疫苗抗体效价维持正常水平。

应用前景展望

相较于传统F株灭活疫苗，该口服疫苗无需注射，发酵成本降低60%。研究团队正在优化TM1与vlhA的多价展示方案，未来拟开展10万羽规模田间试验。鉴于S. cerevisiae的GRAS（公认安全）特性，该技术路线有望拓展至猪肺炎支原体等动物呼吸道病原体防控领域。