驼背石斑鱼脾脏新型细胞系CAS的建立及其在病原易感性研究中的应用

这篇研究成功建立了驼背石斑鱼（Cromileptes altivelis）脾脏来源的新型细胞系CAS，该细胞系具有稳定的二倍体核型（2n=48），可高效表达外源基因（如GFP），并对哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）、杀鲑气单胞菌（Photobacterium damselae）、神经坏死病毒（NNV）和传染性脾肾坏死病毒（ISKNV-HN）等病原体表现出显著敏感性，为水产病原-宿主互作机制研究提供了重要体外模型。

　　

Highlight

本研究首次从驼背石斑鱼脾脏组织成功建立名为CAS的连续细胞系，该细胞系在含20%胎牛血清(FBS)的L-15培养基中呈现典型成纤维细胞样形态，经100代以上传代及液氮冻存后仍保持80%以上存活率。线粒体细胞色素c氧化酶亚基I(COI)和18S核糖体RNA(18S rRNA)基因测序证实其物种来源。

细胞生长与形态

原代培养15天即可形成单层细胞（图1C），染色体分析显示其二倍体特征（48条）。转染实验证明CAS细胞能高效表达绿色荧光蛋白(GFP)，为基因编辑研究奠定基础。在细菌攻毒实验中，哈维氏弧菌(V. harveyi)比杀鲑气单胞菌(P. damselae)表现出更强细胞毒性，后者则通过磷脂酶D等毒力因子诱发细胞凋亡。

讨论

CAS细胞对病毒敏感性实验显示：接种神经坏死病毒(NNV)和传染性脾肾坏死病毒(ISKNV-HN)后，细胞出现典型病变效应(CPE)，病毒蛋白表达量显著升高，同时Mx蛋白等免疫相关基因表达上调。该细胞系为研究石斑鱼病原感染机制、疫苗开发及抗病育种提供了理想平台。

Conclusion

CAS细胞系兼具病原敏感性高和基因操作便利的特点，既能用于水产病毒分离鉴定，又可作为研究宿主免疫应答的体外模型，对推动石斑鱼疾病防控技术发展具有重要价值。