苦参水提物通过调控MAPK通路抑制柔嫩艾美耳球虫诱导的炎症反应及抗球虫机制研究

为解决传统抗球虫药物耐药性问题，研究人员开展苦参水提物(SFAE)抗柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)研究。通过体内外实验证实，SFAE显著降低鸡只病变评分(ACI=162.8)，抑制p38/MEK磷酸化，下调IL-1β/IL-6/TNF-α等促炎因子，修复肠绒毛结构。该研究为开发新型植物源抗球虫制剂提供理论依据。

　　

家禽球虫病是全球养殖业面临的重大挑战，其中柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)引起的盲肠球虫病可导致血便、生长迟滞甚至死亡，每年造成数十亿美元经济损失。传统抗球虫药物如地克珠利(diclazuril)因长期使用产生耐药性，而疫苗研发又受限于虫株抗原多样性。在此背景下，具有抗炎和抗寄生虫活性的传统中药苦参(Sophora flavescens)进入研究者视野——其活性成分苦参碱和 flavonoids 已被证实可调节免疫反应，但具体抗球虫机制尚不明确。

为探究苦参水提物(SFAE)的抗球虫效果及分子机制，吉林农业大学动物科技学院的Zhe Zheng团队在《Poultry Science》发表研究，通过建立白羽肉鸡感染模型和MDBK细胞实验，系统评估了SFAE对MAPK信号通路的调控作用。研究采用四组设计：阴性对照(NC)、感染组(PC)、感染+SFAE组(PC+SF)和感染+地克珠利组(PC+DC)。关键技术包括：1) 通过抗球虫指数(ACI)综合评价疗效；2) ELISA检测血清IL-1β/IL-6/TNF-α/IL-10水平；3) qPCR和Western blot分析MAPK通路基因(ERK/MEK/JNK/Raf1)表达；4) HE染色观察盲肠病理变化。

抗球虫指数检测结果

感染组(PC)出现典型血便，存活率降至83%，ACI仅74.47；而PC+SF组ACI达162.8，病变评分显著降低(p<0.01)，第6天后增重与NC组无差异(p>0.05)。

苦参水提物对盲肠组织病理学影响

HE染色显示PC组出现绒毛脱落(黄色箭头)和淋巴细胞浸润(绿色箭头)，PC+SF组绒毛结构完整，炎症明显减轻，效果与PC+DC组相当。

MDBK细胞活力测定

浓度≤10 mg/mL的SFAE对细胞活力无显著影响(p>0.05)，而25-100 mg/mL则产生毒性(p<0.05)，故后续实验采用10 mg/mL。

对蛋白磷酸化水平的抑制作用

Western blot显示PC组p38和p-MEK水平显著升高(p<0.01)，PC+SF组能显著抑制其磷酸化(p<0.01)，第10天恢复至NC水平(p>0.05)。

血清细胞因子水平

PC组促炎因子IL-1β/IL-6/TNF-α显著上升(p<0.01)，抗炎因子IL-10下降(p<0.01)；PC+SF组可逆转这种变化，第6天后细胞因子水平与NC组无统计学差异。

MAPK通路基因转录水平

qPCR证实PC组ERK/MEK/JNK/Raf1 mRNA表达量显著上调(p<0.01)，PC+SF组能显著下调这些基因表达(p<0.01)。

讨论与结论

研究表明，SFAE通过双重机制发挥抗球虫作用：一方面直接抑制E. tenella发育(使卵囊值从40降至10)，另一方面通过调控MAPK通路关键节点(p38/MEK)，降低IL-1β等促炎因子释放，同时促进IL-10分泌，从而减轻肠道炎症损伤。值得注意的是，SFAE(ACI=162.8)虽略低于地克珠利组(166.9)，但显著优于低效标准(120≤ACI<160)，且能完全修复肠绒毛结构。该发现为开发替代抗生素的植物源抗球虫制剂提供了重要理论依据，其水提工艺符合药典标准，具有临床应用潜力。未来研究可进一步解析苦参中matrine与flavonoids的协同作用机制。