基于NanoBiT技术的体内伪病毒生物传感器：实时监测SARS-CoV-2刺突蛋白/hACE2互作及抗病毒药物筛选

本研究创新性开发了基于NanoLuc二元技术（NanoBiT）的体内生物传感器，通过构建LgBiT-hACE2转基因小鼠模型与SmBiT标记的伪病毒系统，首次实现活体动物中SARS-CoV-2刺突蛋白与hACE2受体互作的实时动态成像（6小时内检出），并验证黄芩素/黄芩苷对病毒入侵的协同抑制作用（抑制率达90%），为抗COVID-19药物筛选提供了新型可视化研究平台。

　　

Highlight

本研究建立了一种创新的体内NanoBiT伪病毒生物传感器系统，通过将SmBiT片段标记的SARS-CoV-2刺突蛋白（BA.2-SmBiT）伪病毒与表达LgBiT-hACE2的转基因小鼠相结合，实现了病毒-宿主互作过程的实时动态监测。当刺突蛋白与受体结合时，NanoLuc荧光素酶重组产生可定量生物发光信号，感染后6小时内即可通过活体成像系统（IVIS）检测。

Construction and characterization of the NanoBiT-based pseudoviral biosensor

通过三质粒系统构建的BA.2-SmBiT伪病毒成功组装（电镜验证），其与LgBiT-hACE2的结合可触发显著的发光信号。体外实验显示，该系统的检测灵敏度较传统方法提升10倍，且能动态反映病毒入侵的时空分布特征。

Conclusion

该技术平台首次在生理条件下实现了病毒入侵过程的非侵入式可视化，并证实黄芩素（靶向刺突蛋白）与黄芩苷（靶向hACE2）的联合用药方案具有显著协同效应。这种模块化设计为研究其他包膜病毒（如流感、HIV）的宿主互作机制提供了普适性解决方案。