β-乳球蛋白-低聚半乳糖/麦芽糖复合物在体内消化过程中的肽段释放、肠道菌群及代谢物变化比较研究

本研究通过高分辨质谱(HRMS)、16S rDNA测序和非靶向代谢组学技术，系统比较了β-乳球蛋白(BLG)与低聚半乳糖(GOS)/麦芽糖(Mal)复合物在体内消化时肽段释放特征、肠道菌群结构及代谢通路变化，揭示了长碳链糖修饰通过激活甘油磷脂代谢和脯氨酸/酪氨酸通路改善肠道健康的新机制。

　　

Highlight

• BLG-Mal和BLG-GOS复合物展现胃酸抵抗特性

• 糖基化修饰显著增加<3 kDa小肠肽段比例（主要为<5氨基酸短肽）

• GOS大分子量碳链结构对菌群调控作用优于Mal

• 复合物激活甘油磷脂代谢和脯氨酸/酪氨酸通路

Materials

牛乳源β-乳球蛋白(BLG)购自Sigma-Aldrich，低聚半乳糖(GOS)由上海麦克林生化科技提供。

Sample preparation

参照Wang等的方法，将BLG与GOS/Mal按质量比1:2溶于超纯水，50℃反应72小时后透析冻干。

SDS-PAGE

如图S1所示，BLG-GOS和BLG-Mal条带明显上移，证实糖基化使蛋白分子量增加（p<0.05）。

Molecular Weight Distribution of Peptides

图S2显示，三组样品特征洗脱峰无显著差异（p>0.05），但BLG-GOS的<3 kDa肽段占比降低12.7%。

Conclusion

BLG糖基化复合物在胃消化阶段保持完整，但肠消化1小时后完全水解。糖基化使<3 kDa肽段减少15%-20%，并通过激活SCFAs代谢通路重塑肠道微生态。