重组蛛丝蛋白偶联CD40激动剂增强人类B细胞体外活化能力——肿瘤免疫治疗新模块

本文推荐一种基于重组蛛丝蛋白（4RepCT）的新型药物递送平台，通过分选酶A（Sortase A）将CD40单链抗体片段（scFvCD40）偶联至蛛丝微球/纤维涂层，实现局部CD40受体簇化激活。实验证实该构建体可显著上调B细胞共刺激分子CD86（3倍）并促进增殖（4倍），为克服肿瘤微环境T细胞耐受提供了潜在解决方案。

　　

亮点

本研究开发了一种基于重组蛛丝蛋白的创新策略：通过分选酶介导的偶联技术，将CD40靶向单链抗体片段（scFv_CD40）精准锚定在蛛丝微结构上。这种设计巧妙利用了蛛丝的自组装特性（可形成纤维或微球）与scFv的靶向性，创造出能强力激活免疫细胞的"智能支架"。

实验设计

研究首先优化了scFv_CD40与两种蛛丝蛋白（含1/5个N端甘氨酸的G-silk/G₅-silk）的酶偶联条件。通过CD40L报告细胞系验证生物活性后，重点测试了该构建体对原代人类B细胞的激活效果——不仅诱导CD86分子表达上调3倍（提示抗原呈递能力增强），还驱动B细胞群体扩增4倍。更令人振奋的是，蛛丝微球版本同样展现出优异的CD40激活能力，其可注射特性为肿瘤局部免疫调控铺平道路。

讨论

与传统游离型CD40激动剂相比，蛛丝支架创造了"受体簇化热点"：①物理交联迫使CD40受体聚集，增强信号传导；②局部高浓度降低系统毒性风险；③微球尺寸可限制药物扩散，实现精准打击。这种"三合一"优势使其在克服肿瘤免疫抑制微环境时独具潜力。

结论

该研究成功构建了保留生物活性的scFv_CD40-蛛丝复合体，其通过独特的三维激活模式：

1?? 触发B细胞活化-增殖双通路

2?? 提升抗原呈递效率

3?? 微球版本兼具注射适用性

为开发下一代肿瘤局部免疫疗法提供了全新工具包。