基于转录组学与实验验证的卵巢癌泛素化相关基因预后模型构建及FBXO45调控机制研究

本研究通过整合TCGA和GTEx数据库的转录组数据，结合泛素化相关基因（UBQ）筛选，构建了包含17个关键基因的卵巢癌（OV）预后模型（1/3/5年AUC=0.703-0.705），证实高风险组总体生存率显著降低（P<0.05）。研究首次揭示FBXO45作为核心E3泛素连接酶通过Wnt/β-catenin通路促进OV恶性进展，并发现低风险组具有更活跃的CD8+ T细胞和M1巨噬细胞浸润（P<0.01）。该模型为OV精准治疗提供新靶点，尤其为PROTACs药物开发奠定理论基础。

　　

1 引言

卵巢癌（OV）作为妇科恶性肿瘤死亡率之首，70%患者确诊时已进展至晚期，5年生存率仅29%。研究聚焦泛素化修饰在OV恶性进展中的关键作用，该过程通过E1-E2-E3酶级联反应调控肿瘤增殖、转移及免疫微环境（TME）。随着蛋白降解靶向嵌合体（PROTACs）技术的发展，泛素化相关基因的临床价值日益凸显。

2 材料与方法

研究整合TCGA-OV和GTEx数据库中376例肿瘤与88例正常组织转录组数据，通过差异表达分析（|logFC|≥1，p<0.01）筛选8035个差异基因（DEGs），与929个泛素化相关基因取交集获得162个关键基因。采用LASSO回归和DEVIANCE检验构建17基因预后模型，风险评分公式为：风险评分=∑（回归系数×基因表达量）。实验验证选用A2780和HEY细胞系，通过siRNA沉默FBXO45后检测增殖（CCK-8）、迁移（Transwell）及侵袭能力。

3 结果

3.1 预后模型构建

模型在训练集（TCGA）中1/3/5年AUC达0.703-0.705，高风险组总生存期显著缩短（P<0.05）。外部验证（GSE165808/GSE26712）显示一致趋势。免疫分析揭示低风险组CD8⁺ T细胞（P<0.05）、M1巨噬细胞（P<0.01）浸润更显著，而高风险组多见MUC17/LRRK2突变。

3.2 FBXO45功能验证

单细胞测序显示FBXO45与卵母细胞关联最强。临床样本中其表达与PD-L1（CD274）正相关（P<0.001）。体外实验证实沉默FBXO45可抑制OV细胞增殖（G1期阻滞）、迁移（伤口愈合速率下降50%）及侵袭（Transwell穿膜数减少60%）。

3.3 机制探索

KEGG富集发现FBXO45高表达组Wnt通路激活（NES=2.196）。Western blot显示沉默FBXO45后β-catenin、WNT1和c-Myc蛋白水平显著下调。临床组织检测证实OV样本中FBXO45与WNT1共表达（P<0.01）。

4 讨论

研究首次系统阐明泛素化相关基因在OV预后分层中的价值，其中FBXO45通过调控Wnt/β-catenin通路驱动肿瘤进展。模型核心基因TRAF4和UBE2L3等均与已知致癌通路（如PI3K/Akt）相关。值得注意的是，FBXO45可能通过稳定PD-L1促进免疫逃逸，这为PD-1抑制剂疗效预测提供新思路。

5 结论

该研究不仅建立首个OV泛素化相关预后模型，更揭示FBXO45作为治疗靶点的潜力。未来可通过开发FBXO45特异性PROTACs降解剂，或联合Wnt通路抑制剂实现精准治疗。