中性粒细胞胞外诱捕网与关键基因驱动因素在不明原因妊娠丢失中的解码研究

这篇研究通过整合临床、组织病理学和转录组学方法，首次揭示了中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）与不明原因复发性流产（uRPL）的关联机制。研究发现uRPL患者血清NETs标志物（MPO-DNA/citH3）显著升高，并鉴定出4个核心NETs相关差异表达基因（C3AR1/ITGAM/ITGB2/LYZ），其与M2型巨噬细胞极化共同导致蜕膜免疫微环境失衡。研究为uRPL提供了新型诊断标志物和治疗靶点。

　　

背景

复发性流产（RPL）影响约2.5%的育龄女性，其中近半数病例病因不明（uRPL）。中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）作为中性粒细胞释放的DNA-组蛋白网状结构，已被证实与多种妊娠并发症相关，但其在uRPL中的作用机制尚未阐明。

材料与方法

研究纳入34例uRPL患者和30例健康对照（HC），通过ELISA检测血清NETs标志物（MPO-DNA、citH3），对6例uRPL和5例HC的蜕膜组织进行转录组测序。结合加权基因共表达网络分析（WGCNA）和机器学习（LASSO/SVM-RFE/RF）筛选关键基因，采用免疫组化、Western blot和CIBERSORT算法验证基因表达与免疫细胞浸润特征。

结果

uRPL组血清MPO-DNA（50.85±20.28 vs 20.40±7.78 ng/ml）和citH3（4.74±1.93 vs 6.88±1.22 ng/ml）水平显著升高。转录组分析鉴定出21个NETs相关差异表达基因（DE-NRGs），其中C3AR1、ITGAM（CD11b）、ITGB2（CD18）和LYZ通过机器学习被确定为核心基因。Western blot证实这些基因在uRPL蜕膜组织中蛋白表达上调（p<0.01）。

免疫浸润分析显示uRPL组CD8⁺ T细胞、M2巨噬细胞和中性粒细胞浸润增加，而CD4⁺记忆T细胞、滤泡辅助T细胞和单核细胞减少。基因-免疫相关性分析揭示所有核心DE-NRGs与M2巨噬细胞呈正相关（r>0.6），与滤泡辅助T细胞和单核细胞负相关（r<-0.5），LYZ还与中性粒细胞浸润正相关（r>0.5）。

讨论

研究发现补体受体C3AR1可能通过JAK-STAT和HIF-1通路参与NETs形成；整合素ITGAM/ITGB2异二聚体（CD11b/CD18）通过调节白细胞迁移促进炎症反应；LYZ则可能通过抗菌作用加剧蜕膜微环境失衡。值得注意的是，基于核心DE-NRGs构建的列线图模型显示出优异诊断效能（AUC>0.85）。

结论

该研究首次阐明NETs通过C3AR1/ITGAM/ITGB2/LYZ基因网络和M2巨噬细胞极化驱动uRPL发生的分子机制，为临床提供潜在诊断标志物和治疗靶点。未来需扩大样本验证并探索NETs抑制剂在动物模型中的干预效果。