藜麦蛋白水解物中胰脂肪酶抑制肽的靶向钓取及其抗肥胖机制研究

本文创新性地采用配体钓取技术（ligand fishing），将胰脂肪酶（PL）固定在Fe3O4@SiO2磁性颗粒上，从藜麦蛋白水解物（QPH）中高效筛选出3种新型PL抑制肽（LNEILAHE、VETELEKR、TVSAPSPK），其IC50值为0.48-0.92 mg/mL，并通过分子对接揭示了氢键/疏水相互作用机制，为天然抗肥胖候选药物开发提供了新策略。

　　

Highlight

本研究首次将配体钓取技术（ligand fishing）与磁性固定化胰脂肪酶（PL-Fe₃O₄@SiO₂）相结合，成功从藜麦蛋白水解物（QPH）中"钓取"出3种具有抗肥胖潜力的新型肽段——这些"分子渔获"不仅展现出剂量依赖的脂肪细胞分化抑制能力，其中TVSAPSPK更能在1500 mg/mL浓度下使细胞内甘油三酯（TG）含量骤降66.36%，堪称天然的"脂肪剪刀"。

Fabrication of magnetic particles immobilized with PL

通过系统优化戊二醛（GA）交联条件（1.25%浓度）、PL负载量（60 mg/mL）和磁性颗粒用量（2.5 mg/mL），成功构建出性能优异的PL-Fe₃O₄@SiO₂复合体——这种"磁性鱼竿"不仅具有180 mg/g的高载酶量，经10次循环使用后仍能保持39.23%的酶活，其超顺磁性特性更可实现10秒内的快速分离，完美解决了传统筛选方法耗时耗力的痛点。

Conclusion

该研究如同在藜麦蛋白的"海洋"中精准垂钓，通过创新的"酶诱饵-磁分离"策略，首次揭示LNEILAHE和TVSAPSPK通过混合竞争机制（mixed-competitive）与PL活性口袋结合，而VETELEKR则采用反竞争抑制（anti-competitive）模式——这些发现不仅验证了配体钓取技术在活性肽筛选中的独特优势，更为开发新一代安全有效的天然源抗肥胖制剂提供了分子蓝图。