丹麦酒精性肝炎患者中细胞溶素阳性粪肠球菌的低检出率及其与生存期的无相关性：一项前瞻性队列研究

这篇前瞻性队列研究探讨了细胞溶素阳性粪肠球菌（E. faecalis）在丹麦酒精性肝炎（AH）患者中的检出率及其与180天死亡率的关系。研究发现仅10.7%患者检出该菌株，且与阴性患者相比死亡率无显著差异（33% vs 36%，p=1.0），挑战了既往关于该菌株与AH高死亡率强相关的结论，为地域性微生物组差异对疾病预后的影响提供了新证据。

　　

摘要

酒精性肝炎（AH）作为酒精性肝病（ALD）的危重类型，其180天死亡率高达20-50%，但缺乏有效治疗手段。2019年Duan等报道细胞溶素阳性粪肠球菌（E. faecalis）与AH患者89%的180天死亡率显著相关，而本研究在丹麦队列中仅检出10.7%阳性率（3/28），且阳性组与阴性组180天死亡率无差异（33% vs 36%）。研究通过qPCR检测粪便样本中cylL_S/cylL_L基因，并优化引物设计以规避既往序列错误，为微生物组干预疗法的地域适用性提出新思考。

材料与方法

研究设计：BATTLE研究纳入30例AH住院患者，最终28例完成随访。入组标准包括近期每日酒精摄入>40/60g（女性/男性）且血清胆红素>50μmol/L，排除胆道梗阻等其他肝病。

检测技术：粪便样本经RNAlater固定后，采用MALDI-TOF质谱鉴定菌株，DNeasy Powersoil Pro Kit提取DNA。创新性使用跨cylL_LF/cylL_SR引物（201bp产物）同步检测双基因，BLASTN验证205株公共基因组中99%存在该基因簇保守性。

统计方法：Fisher精确检验比较组间死亡率，Mann-Whitney U检验分析非正态分布数据。

结果

基线特征：阳性组Child-Pugh评分略高但无统计学差异（p>0.05），两组年龄、GAHS评分、MELD评分等均匹配。

生存分析：1年总死亡率53.6%，但阳性组与阴性组在30/90/180/365天死亡率均无差异（log-rank p=0.82）。死亡主因为肝衰竭（12/15例）。

微生物特征：成功分离7株粪肠球菌中3株为细胞溶素阳性，与qPCR结果完全一致。抗生素使用（57%患者）未显著影响生存期（p=0.25）。

讨论

本研究未能重复Duan等的高阳性率（31.6%）及死亡率差异，可能源于：

1. 1.

   地域差异：丹麦抗生素使用率低可能改变肠道菌群构成；

2. 2.

   方法学优化：修正错误引物序列提升检测特异性；

3. 3.

   样本局限：仅3例阳性结果需更大样本验证。

现有微生物干预策略中，广谱抗生素（如阿莫西林-克拉维酸）未显示生存获益，而粪菌移植（FMT）在印度研究中使90天生存率提升18.4%。尽管噬菌体靶向治疗在动物模型有效，其临床应用仍受限于监管框架缺失。

结论

细胞溶素阳性粪肠球菌的致病性可能具有人群特异性，强调在微生物组研究中考虑地域因素的必要性。继续探索肠道菌群与AH死亡的关联，将为个体化治疗开辟新路径。